Investigation of Appoptotic Effect of Silibinin on CCL-228-SW 480 Column Cancer Cell Line: An In Vitro Study

Silibinin'in Vitro Ortamda CCL-228-SW 480 Kolon Kanseri Hücre Hattı Üzerine Apoptotik Etkisinin Araştırılması

Abstract

Objective: Colon cancer is a major cause of morbidity and mortality in the world. It is third of cancer-related deaths after breast and lung cancer in women, lung cancer and prostate cancer in males. Silibin is an extract obtained from the plant of the thistle (silybum marianum). Studies have shown that silibin is a cancer chemoprotective agent in skin, stomach cancers, and shows anticarcinogenic effect. At the same time it's known that it suppresses cell cycle in breast, colon, bladder cancer cell lines and suppresses apoptosis-induced lung tumor growth. In our study, we aimed to investigate the effect of silibin on CCL-228-SW 480 colon carcinoma cell line in monolayer culture medium. Material-Method: ID50 inhibition was determined on the dose for silibin and after it was found 100 ?M/ml was applied to the cells to examine the effect of silibin on CCL228-SW 480 colon carcinoma cell line. Silibin (100 ?M/ml) was administered and after 24, 48 and 72 hours the BRDU marking index and active caspase-3 assay were determined by immunohistochemistry.Results: The ID50 inhibition dose of silibinin CCL-228-SW 480 colon carcinoma cells was determined to be 100 ?M/ml. Silibin decreased the number of cells marked with BRDU and increased the number of cells stained with caspase-3 in the two-dimensional culture.Conclusion: As a result, silibin CCL-228-SW 480 inhibited cell proliferation and apoptosis in colon cancer cell line. We believe that the results of our two-dimensional culture, which we have made here, will shed light on silibin and cancer studies to be done later.

Özet

Amaç: Kolon kanseri, dünyada önemli bir morbidite ve mortalite nedenidir. Kolon kanseri, kansere bağlı ölümlerde erkeklerde akciğer ve prostat kanseri; kadınlarda meme ve akciğer kanserinden sonra üçüncü sırada yer almaktadır. Silibin, devedikeni (silybum marianum) bitkisinden elde edilen bir ekstraktır. Yapılan çalışmalarda silibinin deri, mide kanserlerinde kanser kemoprotektif ajan olduğu ve antikarsinojenik etki gösterdiği tespit edilmiş ayrıca meme, kolon, mesane kanseri hücre hatlarında hücre siklusunu durdurduğu ve apopitozisi tetiklediği akciğer tümörü büyümesini baskıladığı, gösterilmiştir. Çalışmamızda silibinin CCL-228-SW 480 kolon karsinoma hücre soyu üzerine etkisini monolayer kültür ortamında incelemeyi amaçladık. Materyal-Method: Çalışmamızda silibinin CCL-228SW 480 kolon karsinoma hücre soyu üzerine etkisini incelemek amacıyla 100 µM/ml doz silibin (ID50 inhibisyon dozu belirlenen) hücrelere uygulandı. Silibin (100 µM/ml) uygulandıktan sonra 24, 48 ve 72 saat süreler sonunda BRDU işaretleme indeksi ve aktif kaspaz-3 tayinine immünohistokimyasal yöntemle bakıldı. Bulgular: CCL-228- SW 480 kolon karsinoma hücrelerinde silibinin ID50 inhibisyon dozu 100 ?M/ml olarak belirlendi. Silibinin iki boyutlu kültür ortamında BRDU ile işaretlenen hücrelerin sayısını azalttığı, kaspaz-3 ile boyanan hücrelerin sayısını ise arttırdığı görüldü.Sonuç: Sonuç olarak silibin CCL-228-SW 480 kolon kanseri hücre soyunda hücre proliferasyonunu inhibe edici ve apoptozisi tetikleyici etki göstermiştir. Buradan yola çıkarak yapmış olduğumuz iki boyutlu kültür sonuçlarımızın daha sonra yapılacak silibin ve kanser çalışmalarına ışık tutacaği kanısındayız.