Journals / Mikrobiyoloji Bülteni / 2002 / Cilt: 36 - Sayı: 2

Comparison of routine susceptibility tests and mecA gene analysis for the determination of methicillin resistance in Staphylococcus aureus isolates

Staphylococcus aureus izolatlarının metisilin direncinin saptanmasında rutin duyarlılık testleri ve mecA gen analizi sonuçlarının karşılaştırılması

Pages
133–140
DOI
—

Abstract

Currently,'oxacillin disk diffusion test is the most frequently employed method to detect the methicillin resistance of Staphylococcus aureus isolates. However, due to some of the test conditions, errors may occur during the detection of heteroresistant bacteria. It is now widely accepted that lower incubation temperatures (<35°C) and media with a NaCI concentration of 2-4%, could facilitate detection. In our study, methicillin (oxacillin) susceptibilities of 125 S.aureus isolates were determined by the disk diffusion and microdilution tests asdefined by National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS), and the results were compared with those of mecA gene analysis. In the routine susceptibility tests, 75 isolates were found to be methicillin resistant (MRSA), whereas 50 were found to be susceptible (MSSA). Various induction tests were performed to investigate the heterogeneous resistance among methicillin-susceptible isolates. These induction tests showed that the MIC values of seven isolates reached to the resistant levels, therefore these isolates should be accepted as "borderline oxacillin resistant S.aureus" isolates lacking the mecA gene. The susceptibility tests and mecA gene analysis of the remaining isolates yielded compatible results. In conclusion, susceptibility tests, when performed according to NCCLS recommendations, are found to be reliable and decisive, for the detection of methicillin resistance of S.aureus.

Özet

Günümüzde Staphylococcus aureus izolatlarının metisilin direncinin belirlenmesinde en sık oksasilin diski (1;ug) ile disk difüzyon testi kullanılmaktadır. Ancak yöntemin uygulanma koşullarına bağlı olarak heterorezistan bakterilerin saptanmasında hatalar olabilmektedir. Özellikle düşük ısılarda (< 350C) ve %2-4 NaCI içeren ortamlarda heterojen direncin daha kolay saptanabildiği bildirilmektedir. Çalışmamızda 125 S.aureus susuna NCCLS (National Committee for Clinical Laboratory Standards) önerileri doğrultusunda disk difüzyon ve mikrodilüsyon testleri uygulanmış, elde edilen sonuçlar mecA gen analizi sonuçlarıyla karşılaştırmıştır. Rutin duyarlılık testleriyle izolatların 75'inin metisiline dirençli (MRSA), 50'sinin metisiline duyarlı (MSSA) olduğu belirlenmiştir. Metisiline duyarlı bulunan izolatlarda heterojen direnci araştırmak için ayrıca çeşitli indüksiyon testleri de yapılmıştır. İndüksiyon testleriyle yedi izolatın metisilin MİK değerlerinin dirençli düzeye ulaştığı ve bunların "borderline oxacillin resistant S.aureus" izolatları olduğu, mecA geninin bulunmadığı saptanmıştır. Diğer izolatların duyarlılık test sonuçlarıyla mecA sonuçları uyumlu bulunmuştur. Çalışma sonucunda, S.aureus suşlarının metisilin direncinin saptanmasında NCCLS önerileri doğrultusunda uygulanan duyarlılık testlerinin doğru ve güvenilir sonuçlar sağladığı belirlenmiştir.

Keywords: Staphylococcus aureus,Metisilin direnci,İlaç direnci, bakteriyel,Mikrobiyal duyarlılık testleri,Mikrobiyolojik teknikler