Journals / Mikrobiyoloji Bülteni / 2002 / Cilt: 36 - Sayı: 2
Evaluation of western blot method for the serological diagnosis of Helicobacter pylori infections
- Journal
- Mikrobiyoloji Bülteni
- Pages
- 153–160
- DOI
- —
Abstract
Recent studies have demonstrated that immünoblot method is more sensitive and specific than enzyme immunoassays (EIA) to diagnose Helicobacter pylori infections, and it also permits the detection of antibody profiles against different bacterial antigens including the virulence factors. The aim of this study was to evaluate the diagnostic value of Western Blot (WB) method in the serological diagnosis of H.pylori infections, For this purpose, H.pylori IgG and IgA antibodies have been searched qualitatively by a commercial WB test (Euroimmun GmbH, Germany),'in the sera'of 23 patients (9 female, 14 male) ages between 6-70 years old (13 children, 10 adults), who were diagnosed as H.pylori infection with the positive results of at least three of the conventional methods (culture and polymerase chain reaction of endoscopie biopsy specimens, 13C urea breath test, serum IgG-EIA methods). All of the patients (100%) were found positive by WB-IgG, and 9 (39%) were positive by WB-IgA tests. H.pylori IgG and IgA antibodies showed reactivity with the different combinations of p120 (CagA), p95 (VacA), p29 (UreA) and p66 (UreB) antigens. The number of positive samples for CagA-IgG, VacA-IgG, UreA-IgG, CagA-lgA and UreA-lgA were 19,17, 21, 8 and 4, respectively, whrle there were no positive sample for VacA-lgA. The antigenic distribution did not show any difference between age and sex of the patients. In our study the sensitivities of WB-IgG and WB-IgA methods were estimated as 100%and 39%, respectively, which were in accordance with the studies in literature. As a result, WB-IgG method appears to be useful and reliable for the detection of antibody profiles to H.pylori antigens and virulence factors, rather than routine and screening purposes, however the diagnostic value of WB-IgA method is low. It was thought that the results of our preliminary study should be confirmed by other studies including larger patient populations and control groups, in our country.
Özet
Son yıllarda Helicobacter pylori enfeksiyonlarının serolojik tanısında, immünoblot yöntemlerinin, enzim immün yöntemlerinden (EIA) daha yüksek duyarlılık ve özgüllüğe sahip olduğu ve ayrıca bakterinin çeşitli antijenlerine karşı antikor profilini saptayabildiği bildirilmektedir. Bu çalışmada, H.pylori enfeksiyonlarının serolojik tanısında Western Blot (WB) yönteminin tanısal değerinin araştırılması planlanmıştır. Bu amaçla, klinik yakınmaları olan ve endoskopik biyopsi örneklerine uygulanan kültür ve polimeraz zincir reaksiyonu,13C üre nefes testi ve serum IgG-EIA yöntemlerinden en az üçünün pozitifliği ile tanı konulan 13 çocuk (6-18 yaş) ve 10 erişkin (25-70 yaş) olmak üzere toplam 23 hastanın (9 kadın,14 erkek) serum örneklerinde WB yöntemiyle (Euroimmun GmbH, Germany) kalitatif olarak H.pylori IgG ve IgA antikorları araştırılmıştır. WB-IgG yöntemiyle 23 hastanın hepsinde (%100), WB-IgA yöntemiyle 9'unda (%39) pozitiflik saptanmıştır. H.pylori IgG ve IgA antikorlarının, p120 (CagA), p95 (VacA), p29 (UreA) ve p66 (UreB) antijenlerinin değişik kombinasyonlarına karşı reaktif olduğu bulunmuştur. CagA-IgG, VacA-lgG, UreA-lgG, CagA-lgA ve UreA-lgA pozitif örnek sayısı sırasıyla 19, 17, 21, 8 ve 4 iken, VacA-lgA pozitif örnek saptanmamış, antijen tiplerindeki dağılımın yaş ve cinsiyete göre farklılık göstermediği belirlenmiştir. Bulgularımız literatürle uyumlu olarak WB-IgG ve WB-IgA yöntemlerinin duyarlılıklarının sırasıyla %100 ve %39 olduğunu göstermektedir. Sonuç olarak, WB-IgG yönteminin rutin ve tarama amacından ziyade, H.pylori antijenlerine ve virülans faktörlerine karşı oluşan antikor profillerinin araştırılmasında güvenle kullanılabileceği, ancak WB-IgA yönteminin tanısal değerinin düşük olduğu kanaatine varılmıştır. Ön çalışma niteliğindeki bu araştırmanın sonuçları, ülkemizde daha geniş hastane kontrol grupları üzerinde yapılacak ileri çalışmalarla desteklenmelidir.