Journals / Mikrobiyoloji Bülteni / 2002 / Cilt: 36 - Sayı: 1
Evaluation of a home-made ELISA kit for the intratypic differentiation of poliovirus type-1 strains isolated from acute flask paralysis cases
- Journal
- Mikrobiyoloji Bülteni
- Pages
- 71–77
- DOI
- —
Abstract
In this study, we aimed to develop and evaluate an enzyme based immunological method (ELISA) for the intratypic differentiation (whether if Sabin like-SL, or non Sabin like/wild type-NSL) of poliovirus type 1 isolates, in the frame of Polio Eradication Programme (PEP) in Turkey. Five poliovirus type 1 strains which were formerly isolated and identified in our laboratory from fecal samples of acute flask paralysis (AFP) patients, and standard reference strains of vaccine type 1 and prototype wild (Mahoney) polioviruses have been tested into plate wells that bounded with 5 different monoclonal antibodies (mAbs B18, S2-36, M18, B82, M49). The wells which gave high absorbance than cutoff value estimated by comparing negative control wells, were accepted as positive. As a result, the standard poliovirus strains were differentiated correctly, whereas 2 patient isolates were identified as SL and 3 were NSL In conclusion, our home-made ELISA method found to be successful for intratypic differentiation of poliovirus. type 1 isolates, however more detailed studies are necessary in order to increase the susceptibility and specificity of this test.
Özet
Bu çalışmada, Başkanlığımızın dahil olduğu Polio Eradikasyon Programı (PEP) kapsamında, tip 1 poliovirus izolatlarının aşı kaynaklı (Sabin like-SL) ya da vahşi tip (Non Sabin like-NSL) olup olmadıklarının ayırımında (intratypic differentiation) kullanılmak üzere enzim temelli bir immünolojik yöntemin (ELISA) geliştirilmesi ve değerlendirilmesi amaçlanmıştır. Laboratuvarımızda daha önceden akut flask paralizli olguların gaita örneklerinden izole edilen ve tiplendirilen 5 suş, standart referans aşı suşu ve prototip sokak suşu (Mahoney) ile birlikte beş farklı monoklonal antikor (mAb B18, S2-36, M18, B82, M49) ile kaplanmış pleytlerde karşılaştırılmıştır. Bu yöntemde, negatif kontrollerle karşılaştırılarak hesaplanan eşik değerin üzerinde absorbans veren çukurlar pozitif olarak kabul edilmiş ve sonuçlar incelendiğinde, standart suşların doğru olarak ayırd edilebildiği ve hasta izolatlarından ikisinin SL, üçünün ise NSL olarak reaksiyon verdiği belirlenmiştir. Sonuç olarak, ülkemizde poliovirus tip 1 izolatlarının intratipik ayırımında kullanılabilecek ticari bir ELISA kitinin olmaması ve bu ayırımın yurtdışında yapılması sonucu ortaya çıkan zaman ve ekonomik kayıpların önlenebilmesi amacıyla geliştirmiş olduğumuz yöntemin başarılı sonuçlar verdiği, ancak duyarlılık, özgüllük ve güvenilirliğinin artırılması için daha ileri çalışmalara gerek olduğu kanaatine varılmıştır.