Journals / Mikrobiyoloji Bülteni / 2007 / Cilt: 41 - Sayı: 1
İnvestigation of the presence of Clostridium difficile in antibiotik associated diarrhea patiants by culture and toxin detection methods
- Journal
- Mikrobiyoloji Bülteni
- Pages
- 29–37
- DOI
- —
Abstract
Clostridium d/Yf/c/Ve-associated disease can be observed especially in hospitalized patients who use broad-spectrum antibiotics. The aim of this study was to investigate the presence of C.difficile as the causative agent of diarrhea in outpatients and inpatients. During January-December 2005, 45 outpatients and 46 inpatients (of them 11 were intensive care unit patients) who had developed diarrhea due to antibiotic use, were included to the study. In addition 7 intensive care unit personnel and 20 food handlers were also included to the study in order to detect their carrier states. The age range of patients was 16-80 years, and of them 45 (49.5%) were male, while the age range of the personnel was 25-55 years, and of them 21 (78%) were male. Stool samples collected from the study groups were cultivated in C.difficile agar media {C.difficile Agar Base, Oxoid) as well as on routine bacteriologic media, and C.difficile growth was confirmed by latex agglutination test with the use of specific antisera. The presence of C.difficile toxin A was investigated by latex method (Oxoid, UK), and toxin A and B was searched by enzyme-linked immunoassay (ELISA; Seramun GmbH, Serazym C.difficile Toxin A+B), in the stool samples. While C.difficile was isolated from 13 (14.3%) of the 91 samples, no positive result was detected in the personnel. There was no statistically significant difference between outpatient and inpatient groups by^means of C.difficile culture positivity (15.5% and 17.1%,respectively) (p>0.05). All of the culture positive samples were also found positive by ELISA Toxin A+B method (100%), but only 4 of them (30.7%) yielded positive result by Toxin A latex test. It was detected that 84.6% (11/13) of the patients had used ampicillin/sulbactam, 7.7% (1/13) used cotrimoxazole-SXT, and 7.7% (1/13) used macrolide antibiotics. The use of ampicillin/sulbactam was found statistically significant in development of diarrhea (p<0.05). Our data indicated that ELISA Toxin A+B is a reliable method with 100% specificity and sensitivity in the rapid diagnosis of C.difficile until the culture results were obtained, however,although specificity of Toxin A latex test is 100%, its use alone as a primary rapid diagnostic test was not recommended because of its low (30.7%) sensitivity.
Özet
Clostridium difficile ile ilişkili hastalık, özellikle hastanede yatan hastalarda, geniş spektrumlu antibiyotik kullanımına bağlı olarak ortaya çıkabilmektedir. Bu çalışmada, poliklinik ve servis hastalarında antibiyotik kullanımına bağlı olarak gelişen ishallerde etken olarak C.difficile'nln araştırılması amaçlanmıştır. Çalışmaya, Ocak-Aralık 2005 tarihleri arasında hastanemize başvuran ve antibiyotik kullanım öyküsü olan ishalli 45 poliklinik ve 46 (11 'i yoğun bakım) servis hastası dahil edilmiştir. Ayrıca taşıyıcılığın araştırılması açısından, antibiyotik kullanmamış, sağlıklı ancak hastalar ile yakın teması olan 7 yoğun bakım ve 20 gıda personeli de çalışılmıştır. Kırkbeşi (%49.5) erkek olan hastaların yaş aralığı 16-80 yıl, 21'i (%78) erkek olan personelin yaş aralığı ise 25-55 yıldır. Çalışma gruplarından alınan dışkı örnekleri, rutin bakteriyolojik besiyerlerinin yanı sıra C.difficile ağar {C.difficile Ağar Base, Oxoid) besiyerine ekilmiş ve kültürlerde üreyen bakteriler özgül antiserumla yapılan lateks aglütinasyon testi ile doğrulanmıştır. Örneklerde C.difficile toksin A varlığı lateks yöntemi (Oxoid, UK), toksin A ve B varlığı ise enzim immunoassay (ELISA; Seramun GmbH, Serazym C.difficile toxin A+B) yöntemiyle araştırılmıştır. Sonuç olarak, 91 hastadan 13'ünün (%14.3) kültüründen C.difficile izole edilmiş, personelin hiçbirisinde Cdifficile taşıyıcılığı saptanmamıştır. Poliklinik (%15.5) ve servis hastaları (%17.1) arasında C.difficile pozitifliği açısından anlamlı bir fark bulunmamıştır (p>0.05). Kültür pozitifliği saptanan hastaların tümünde ELISA toksin A+B yöntemiyle de pozitiflik (%100) belirlenirken, sadece 4'ü (%30.7) toksin A lateks yöntemi ile pozitif olarak bulunmuştur. Hastaların %84.6'sının (11/13) ampisilin/sülbaktam, birer hastanın (%7.7) ise kotrimoksazol-SXT ve makrolid antibiyotikler kullandığı belirlenmiş; ishal gelişiminde ampisilin/sülbaktam kullanımının istatistiksel açıdan anlamlı olduğu bulunmuştur (p<0.05).Çalışmamızın bulguları, C.difficile saptanmasında kültür sonuçları alınmadanönce %100 duyarlılık ve özgüllüğe sahip ELISA toksin A+B yönteminin hızlı tanı için kullanılabilir olduğunu, buna karşın özgüllüğünün yüksek (%100) olmasına rağmen duyarlılığı düşük (%30.7) olan toksin A lateks yönteminin uygun olmadığını göstermektedir.