Comparison of the indirect immunofluorescence assay performance of Bartonella henselae antigens obtained by Co-cultivation in Vero and HeLa cells

Vero ve HeLa hücrelerinde eş-kültür ile elde edilen Bartonella henselae antijenlerinin indirekt immünofloresan antikor yöntemindeki performanslarının karşılaştırılması

Abstract

The laboratory diagnosis of Bartonella henselae infection is mainly based on serological testing by indirect immunofluorescence assay (IFA). Cell line co-cultivation with B.henselae and agar derivated antigens are the two major procedures used for evaluation of anti-Bartonella antibodies. Vero and Hep-2 cell lines are the most commonly used media for co-cultivation both in-house and commercial diagnostic kits production. However, HeLa cells which are easily supplied and grown, also can easily be infected by B.henselae. The aim of this study was to compare the performances of antigens obtained by co-cultivation of B.henselae ATCC 49882 (Houston-1) in Vero and HeLa Cells in IFA serology. Out of 381 sera samples, 127 (33.3%) were found positive and 195 (51.2%) were found negative by IFA performed by both cell line co-cultivations. The total agreement between the methods were found as 84.5% (322/381), and Cohen kappa value was calculated as 0.68 (strong, coherent). As a result, He- La cells were found to be useful for the preparation of B.henselae antigens to be used in IFA for the serologic diagnosis of B.henselae infections. However different genotype strains and cross reactions with other infectious agents should be investigated by further studies before routine applications of HeLa cell co-cultivations procedure is established.

Özet

Bartonella henselae enfeksiyonunun laboratuvar tanısı indirekt immünofloresans antikor (IFA) ile yapılan serolojik testlere dayanır. B.henselae’nın hücre dizilerindeki eş-kültürleri ve agar ortamlarında üretilen antijenleri, anti-Bartonella antikorlarının değerlendirilmesinde kullanılan iki ana yöntemi oluşturur. Vero ve Hep-2 hücre kültürü serileri, hem laboratuvarda hazırlanan hem de ticari olarak temin edilebilen tanısal kitlerin oluşturulmasında eş-kültür için en sık kullanılan ortamlardır. Bununla birlikte daha kolay sağlanabilen ve üretilebilen HeLa hücreleri de B.henselae ile kolaylıkla enfekte olabilir. Bu çalışmada, B.henselae ATCC 49882 (Houston-1) suşu ile eş-kültürü yapılan Vero ve HeLa hücrelerinden elde edilen antijenlerin, IFA yöntemi ile antikor tespitindeki performanslarının karşılaştırılması amaçlanmıştır. Çalışmamızda, her iki hücre dizisi eş-kültürü antijenleri ile çalışılan IFA yönteminde; 381 serum örneğinin 127 (%33.3)’si pozitif, 195 (%51.2)’i negatif bulunmuş; yöntemler arası toplam uyum %84.5 (322/381) olarak belirlenmiş ve uyumun değerlendirilmesinde Cohen kappa değeri 0.68 (güçlü, tutarlı) olarak hesaplanmıştır. Sonuç olarak, B.henselae enfeksiyonlarının serolojik tanısı için IFA yönteminde HeLa hücrelerinden elde edilen B.henselae antijenlerinin kullanılması yararlı olabilir. HeLa hücrelerinde eş-kültür yönteminin rutin uygulamaya girmesinden önce, farklı genotipteki suşlarla ve diğer enfeksiyöz etkenler ile çapraz reaksiyonların olup olmadığı, planlanacak yeni çalışmalar ile araştırılmalıdır.