Investigation of Bartonella henselae antibodies in serum and plasma samples of kidney transplant patients

Böbrek nakil alıcılarının serum ve plazma örneklerinde Bartonella henselae antikorlarının araştırılması

Özgün SATILMIŞ KİRİŞ,Yüksel AKKAYA,ÇAĞRI ERGİN,İlknur KALELİ,BELDA DURSUN,HÜSEYİN ÇAĞATAY AYDIN

Abstract

Solid organ transplantation is an important therapeutic choice to improve the life quality of patients with end-stage renal disease. Renal transplant recipients have to take immunosuppressive therapy to prevent transplant rejection. However, this treatment increases susceptibility to infection. Bartonella henselae causes systemic, disseminated and silent manifestations in healthy individuals, while the mortality rate is high in immunosuppressive patients in the case of untreated bartonellosis. The diagnosis of B.henselae infections is usually based on serological methods since they are practical, simple and rapid. Recent reports indicated that bartonellosis seen after liver or kidney transplantation have been increased. The aim of this study was to present the antibody seropositivity of B.henselae detected in the serum and plasma samples of renal transplant recipients. This study was aimed to evaluate the antibody seroprevalence in renal transplant recipients and also to compare the antibody results obtained from serum and plasma samples. A total of 59 renal transplant recipients (32 male, 27 female; age range: 20-65 years) followed by Transplantation Unit of Health, Research and Training Center of Pamukkale University, were included in the study. After suspension of lyophilised B.henselae A TCC 49882 (Houston-1); B.henselae co-cultivation to Ve- ro cell culture was performed by the method recommended by Zbinden et al. [Clin Diagn Lab Immunol 1995; 2(6): 693-5]. The cells were taken to co-cultivation in flasks after development of monolayers. In house immunofluorescence antibody (IFA) method was performed with the use of infected cell-coated sli-des. B.henselae antibodies were studied at 1/64 screening dilution both in serum and plasma samples. In our study B.henselae antibody positivity rates found in serum and plasma samples of the patients were 16.9% (10/59) and 6.8% (4/59), respectively (Cohenκ= 0.37). This detected kappa value indicated that the results of serum and plasma samples revealed fair agreement. It should be kept in mind that the use of plasma samples in IFA tests would increase the false negative results. Thus the results of this study supported the general approach for the preference of serum samples for serological tests.

Özet

Organ nakli, son dönem böbrek hastalıklarında hayat kalitesini artıran önemli bir tedavi seçeneğidir. Böbrek nakil alıcılarında, doku atılımının önlenmesi amacıyla uygulanan immünsüpresif tedavi enfeksiyonlara yatkınlık oluşturmaktadır. Sağlıklı bireylerde sistemik, yaygın ve sessiz klinik tablolara neden olan Bartonella henselae, immünsüpresif hastalarda tedavi edilmediği takdirde ölümle sonuçlanabilen enfeksiyonlara yol açabilmektedir. B.henselae enfeksiyonlarının tanısında serolojik yöntemler, uygulamalarının pratik olması ve hızlı sonuç vermeleri nedeniyle tercih edilmektedir. Son yıllarda literatürde özellikle karaciğer ve böbrek organ nakilleri sonrasında bartonelloz kliniğinin görüldüğüne dair raporlar artmıştır. Bu çalışmada, böbrek nakil alıcılarının serum ve plazma örneklerinde B.henselaeye karşı saptanan antikor seropozitifliği-nin sunulması amaçlanmıştır. Çalışmamızda, hem böbrek nakli olmuş hastalarda antikor seropozitifliğinin belirlenmesi, hem de serum ve plazma örneklerinden elde edilen sonuçlar arasında farklılık olup olmadığı değerlendirilmiştir. Çalışmaya, Pamukkale Üniversitesi Sağlık, Araştırma ve Uygulama Merkezi Organ Nakli Biriminde takip edilen 59 böbrek nakil alıcısından (32 erkek, 27 kadın; yaş aralığı: 20-65 yıl) toplanan serum ve plazma örnekleri dahil edilmiştir. Liyofilize B.henselae A TCC 49882 (Houston-1) suşu süspanse edildikten sonra, B.henselaenin Vero hücre kültürlerine ko-kültüvasyonu Zbinden ve arkadaşları [Clin Diagn Lab Immunol 1995; 2(6): 693-5] tarafından belirtilen şekilde yapılmıştır. Hücrelerin tek tabaka oluşumu sağlandıktan sonra, flasklar içinde ko-kültüvasyona alınmıştır. Enfekte hücreler ile kaplanan lamlar kullanılarak gerçekleştirilen in house immünofloresan antikor (IFA) yöntemiyle B.henselae antikorlarının varlığı 1/64 tarama dilüsyonunda serum ve plazma örneklerinde araştırılmıştır. Çalışmamızda, hastaların serum ve plazma örneklerinde B.henselae antikor pozitifliği sırasıyla %16.9 (10/59) ve %6.8 (4/59) oranında tespit edilmiştir (Cohen κ= 0.37). Saptanan kappa değeri, serum ve plazma örnekleri ile alınan sonuçların or-ta uyumlu olduğunu göstermektedir. Her ne kadar genel uygulama olarak serolojik yöntemlerde serum, moleküler yöntemlerde ise plazma örneklerinin kullanımı tercih edilmekteyse de, plazma örnekleri ile çalışılan IFA yönteminde yalancı negatiflik oranlarının artacağı akılda tutulmalıdır