Evaluation of Microscopic Examination, Culture and Polymerase Chain Reaction Tests in the Diagnosis of Trichomonas vaginalis Infection

Trichomonas vaginalis Enfeksiyonu Tanısında Mikroskobik İnceleme, Kültür ve Polimeraz Zincir Reaksiyonu Testlerinin Değerlendirilmesi

Hatice YAZISIZ,Özlem KOYUNCU ÖZYURT,Feryal ÖZTÜRK ERYİĞİT,Betil ÖZHAK,Gözde ÖNGÜT,Murat ÖZEKİNCİ,LEVENT DÖNMEZ,Dilek ÇOLAK,Sibel GÜMÜŞ,Dilara ÖĞÜNÇ

Abstract

Sexually transmitted infections (STIs) are important as a public health problem all over the world. There are some difficulties in prevention and control programs of STIs due to clinical and laboratory diagnostic problems.The most common STIs are Chlamydia trachomatis infections, trichomoniasis and gonorrhea. The study aimed to investigate the direct microscopic examination, culture and polymerase chain reaction (PCR) tests in the diagnosis of Trichomonas vaginalis infection; to determine other microbiological agents that may cause vaginal discharge and to evaluate the various social variables in women with vaginal discharge admitted to the outpatient clinic of Obstetrics and Gynecology in Akdeniz University Hospital. Two hundred and fifteen patients were enrolled in the study. The socio-demographic features of the patients were recorded. Vaginal/endocervical swab specimens taken from patients were evaluated by microscopic examination. Swab specimens were inoculated into blood agar, MacConkey agar and chocolate agar for bacterial culture. Modified Trichosel broth with 5% horse blood (Becton Dickinson, USA) was used for Trichomonas spp. culture. The presence of C.trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, and T.vaginalis in swab samples were investigated by multiplex PCR assay (BD Max CT/GC/TV, Becton Dickinson, USA). At least one pathogen was detected among 65 (30.3%) samples. T.vaginalis was detected by microscopic examination and PCR in four of 215 (1.9%) patients. Existence of yeast morphology was observed in 21 (9.8%) specimens by microscopic examination. Twenty four (11.2%) patients were diagnosed as bacterial vaginosis microscopically according to Nugent score system. Candida species grew in 32 (14.9%) and Streptococcus agalactiaegrew in 2 (0.9%) of the specimens. C.trachomatis was detected in 2 (0.9%) samples and N.gonorrhoeaein 1 (0.5%) sample by PCR. In this study, 95.3% of the patients were married and 96.7% had only one sexual partner in the mean time. The rate of detection of pathogens were statistically higher in women who have had two or more pregnancies (p< 0.05). In our study, T.vaginalis together with N.gonorrhoeae and C.trachomatis were investigated by PCR method in women with vaginal discharge. The use of multiplex PCR test allowed simultaneous investigation of multiple pathogens in the patient samples.

Özet

Cinsel yolla bulaşan enfeksiyonlar (CYBE), tüm dünyada halk sağlığı sorunu olarak önem taşımaktadır. Klinik ve laboratuvar tanı sorunları nedeniyle CYBE’leri önleme ve kontrol programlarında bazı zorluklar bulunmaktadır. Chlamydia trachomatis enfeksiyonları, trikomoniyaz ve gonore yaygın görülen CYBE’lerdir. Bu çalışmada, Akdeniz Üniversitesi Hastanesi Kadın Hastalıkları ve Doğum Polikliniğine başvuruda bulunan ve vajinal akıntısı olan kadınlarda Trichomonas vaginalis enfeksiyonu tanısında direkt mikroskobik inceleme, kültür ve polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) testlerinin değerlendirilmesi, akıntıya neden olabilecek diğer mikrobiyolojik etkenlerin saptanması ve çeşitli sosyal değişkenleri değerlendirmek amaçlanmıştır. Çalışmaya sosyodemografik özellikleri kayıt edilen 215 hasta dahil edilmiştir. Hastalardan alınan vajinal/endoservikal sürüntü örnekleri mikroskobik inceleme ile değerlendirilmiştir. Bakteriyel kültür amacıyla alınan sürüntü örnekleri kanlı agar, MacConkey agar ve çikolata agar besiyerlerine ekilmiştir. Trichomonas spp. kültürü için %5 at serumu eklenmiş modifiye trichosel buyyon (Becton Dickinson, ABD) besiyeri kullanılmıştır. Sürüntü örneklerinde C.trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, T.vaginalis varlığı multipleks PCR (BD Max CT/GC/TV, Becton Dickinson, ABD) ile araştırılmıştır. Toplam 65 (%30.3) örnekte en az bir patojen tespit edilmiştir. İki yüz on beş hastanın 4 (%1.9)’ünde mikroskobik inceleme ve PCR ile T.vaginalis saptanmıştır. Hasta örneklerinin 21 (%9.8)’inde mikroskobik inceleme ile maya morfolojisinde mantar izlenmiştir. Nugent skorlama sistemine göre 24 (%11.2) hastaya mikroskobik olarak bakteriyel vajinozis tanısı konulmuştur. Otuz iki (%14.9) örnekte Candida türleri, 2 (%0.9) örnekte Streptococcus agalactiae üremesi olmuştur. PCR yöntemi ile 2 (%0.9) örnekte C.trachomatis, 1 (%0.5) örnekte N.gonorrhoeae saptanmıştır. Bu çalışmadaki hastaların %95.3’ünün evli olduğu, %96.7’sinin şimdiye kadar cinsel partner sayısının tek olduğu belirlenmiştir. İki veya daha fazla gebelik geçmişi olan kadınlarda patojen saptanma oranı istatistiksel olarak anlamlı düzeyde daha yüksek bulunmuştur (p< 0.05). Çalışmamızda vajinal akıntısı olan kadınlarda PCR yöntemi ile T.vaginalis ile birlikte N.gonorrhoeae ve C.trachomatis araştırılmıştır. Multipleks PCR yönteminin kullanılması hasta örneklerinde birden fazla patojenin eş zamanlı olarak saptanmasına olanak sağlamıştır.