Characterization and Identification of Lactic Acid Bacteria by 16S rRNA Gene Sequence and Their Effect on the Fermentation Quality of Elephant Grass (Pennisetum purpureum) Silage

16S rRNA Gen Sekansı Kullanılarak Laktik Asit Bakterilerinin Fil Çimeninde (Pennisetum Purpureum) Karakterizasyonu, Tanımlanması ve Fermantasyon Kalitesine Etkileri

Azizza 1 1 SIFEELDEIN,Xianjun YUAN,Zhihao 1 DONG,Junfeng LI,Hager YOUNS,Tao SHAO

Abstract

The purpose of this study is to isolate and identify lactic acid bacteria from elephant grass (Pennisetum purpureum) silage and examine their effect on the silage fermentation quality. Three of lactic acid bacteria strains were isolated from elephant silage and their characterization, identification, and influence on silage quality after 90 d of ensiling was studied. All three strains were Gram-positive, catalase-negative, and were grown in 6.5% NaCl and pH 4.00. Strains AZZ1, was identified as for genus pediococcus, whereas, AZZ4 and AZZ7 strains were classified as genus Lactobacillus according to the phenotype, 16S rRNA, and RecA gene analysis. Three strains were used as additives at 1.0×106 CFU/g of fresh material of elephant grass. Strain AZZ4 is found to be the most effective in improving the fermentation quality of the elephant grass silage, as indicated by a lower (P<0.0001) dry matter losses, pH value, water-soluble carbohydrates, acetic acid content, butyric acid, propionic acid and ammonia-N. However, the lactic acid content was higher (P<0.0001) compared to the control and other treatments. In conclusion, these results suggest that, for well-preserved silage, the isolates may be useful as inoculants for silage making, and could play a major role in developing silage production.

Özet

Bu çalışmanın amacı Fil çimeninden (Pennisetum purpureum) laktik asit bakterilerin izolasyonu, tanımlanması ve silaj fermantasyon kalitesine etkilerini araştırmaktır. Üç laktik asit bakteri suşu fil silajından izole edildi ve bunların karakterizasyonu, tanımlanması ve 90 gün sonrasında silaj kalitesi üzerine etkileri çalışıldı. Üç suşun hepsi de Gram-pozitif ve katalaz-negatif olup %6.5 NaCl ve pH 4.00'de büyüme gösterdi. 16S rRNA ve RecA gen analiz sonuçlarına göre AZZ1 suşları pediococcus genusunda tanımlanırken AZZ4 ve AZZ7 suşları Lactobacillus genusunda sınıflandırıldı. Üç suş taze fil çimenine 1.0×106 CFU/g oranında katılarak kullanıldı. AZZ4 suşu daha düşük kuru madde kaybı (P<0.0001), pH değeri, suda çözünür karbohidratlar, asetik asit, burik asit, propiyonik asit ve amonyum-N miktarları baz alındığında fil çimen silajının fermantasyon kalitesini artırmada en etkili olan olarak belirlendi. Ancak laktik asit miktarı kontrol ve diğer uygulamalar ile karşılaştırıldığında daha yüksek olarak tespit edildi (P<0.0001). Sonuç olarak, iyi saklanmış bir silaj için elde edilen izolatların silaj yapımında faydalı olabileceği ve silaj üretimini geliştirmede önemli olabileceği düşünülmektedir.