Journals / Gülhane Tıp Dergisi / 2001 / Cilt: 43 - Sayı: 3
HDL subfraksinasyonunda kullanılan dört çöktürme yönteminin karşılaştırılması
- Journal
- Gülhane Tıp Dergisi
- Pages
- 238–243
- DOI
- —
Abstract
In this study, three methods were compared for measurement of cholesterol in high density lipoprotein (HDL) subtractions, HDL<sub>2</sub> and HDL<sub>3</sub> with dual precipitation method (heparin-MnCl<sub>2</sub>/dextran sulfate). The concentrations of dextran sulfate 500,000 (in heparin-MnCl<sub>2</sub>/dextran sulfate method), polyethylene glycol (PEG) 6,000, PEG 20,000 and dextran sulfate or MgCl, (in dextran sulfate-MgCl<sub>2</sub> method) needed for optimal accuracy of the HDL<sub>3</sub> cholesterol in the supernatant fraction were established. At the final concentration of 0.909 g/L dextran sulfate, 0.136 mol/L MgCl<sub>2</sub>, 15 g/dL PEG 6,000 and 10.0 g/dL PEG 20,000 the values for HDL<sub>2</sub> - cholesterol (obtained by substraction of the cholesterol of HDL<sub>3</sub> fraction-supernatant- from total HDL-cholesterol) in 21 sera did not differ significantly from those obtained by heparin-MnCl<sub>2</sub> /dextran sulfate (final concentration of 205 U/mL heparin and of 91 mM MnCl<sub>2</sub> and of dextran sulfate 0.78 g/L). The precision of the all methods were satisfactory, and was better with the two PEG 20,000 and dextran sulfate/MgCl<sub>2</sub> methods with CV %s of 2.14 and 2.26 respectively, intermediate with PEG 6,000 (2.57%) and poorest with heparin-MnCl<sub>2</sub> dextran sulfate (2.61%).
Özet
Bu çalışmada; yüksek dansiteli lipoprotein (HDL) subfraksiyonları olan HDL 2 ve HDL 3 deki kolesterol ölçümlerinde kullanılan üç yöntem dual çöktürme yöntemi olan heparin-MnCl 2 /dekstran sülfat yöntemi ile karşılaştırıldı. Optimal doğrusallıkla HDL 3 'ün süpernatanda elde edilmesi için gerekli olan dekstran sülfat 500,000 (dual yöntemdeki), polietilen glikol (PEG) 6,000 ve PEG 20,000 ve dekstran sülfat veya MgCl 2 dekstran sülfat-MgCl 2 yönteminde) konsantrasyonları tespit edildi. Bu yöntemde dekstran sülfat 0.909 g/dL, MgCl 2 0.136 mol/L, PEG 6,000 15 g/dL ve PEG 20,000 10 g/dL son konsantrasyonlarında kullanıldı. Total HDL kolesterolünden süpernatandaki HDL3 kolesterolünün çıkarılması ile elde edilen HDL 2 kolesterol değerleri 21 örnekte heparin-MnCl 2 /dekstran sülfat yöntemiyle (205 U/mL heparin 91 mM MnCI2 0.78 g/L dekstran sülfat son konsantrasyonları kullanıldı) elde edilen değerlerden anlamlı bir farklılık göstermedi. Tüm yöntemlerin tekrarlanabilirlikleri tatmin edici seviyedeydi. PEG 20,000; dekstran sülfat-MgCl 2 yöntemleri daha iyi (sırasıyla %2.14 ve 2.26) PEG 6000 orta derecede (%2.57) ve heparin-MnCl 2 /dekstran sülfat ise daha zayıf (%2.61) varyasyon katsayısınına sahiptiler.