Journals / Ege Tıp Dergisi / 2000 / Cilt: 39 - Sayı: 1
Assessment of open and closed systems in amniotic fluid samples
- Journal
- Ege Tıp Dergisi
- Pages
- 19–22
- DOI
- —
Abstract
Total of 100 amniotic fluid samples were cultured both in open and closed systems to compare the growth of cell cultures by using different mediums. Each flask and tube was assessed in respect to cost effect, harvesting time and mitotic index. The 25-cm<sup>2</sup> plastic tissue culture flask and BioAmf I medium with penicilline-streptomycin and L-Glutamine for open system and 10 ml flat bottom tubes and F-10 Ham's Nutrient Mixture/Chang-D mediums supplied Hepes buffer, Ultroser-G, fetal calf serum, penicilline-streptomycin and L-Glutamine for closed system were used. Cell growth was obtained in all samples cultured by using closed system. In one closed culture tube, the number and quality of metaphases were not sufficient. Twenty-eight out of 100 amniotic fluid samples in open system were excluded from the study. Four out of 68 amniotic fluid samples were infected. Each flask for open system cell culture costed 4 times more expensive than each tube for closed system cell culture. The mean mitotic index was 10.46±12.76 in open and 9.76±9.75 in closed system(p>0.05). The mean time for harvesting in 68 cases was 74,00±4,55 days for open and 13,79±3,60 days in 100 cases for closed system. The mean number of medium change was 2,33±1,33 per flask for open system and 7,2±0,46 per tube for closed system.
Özet
Bu çalışmada hücre kültürlerinin açık ve kapalı sistemlerdeki üremeleri değişik besiyerleri kullanılarak karşılaştırıldı. Hücre kültürleri kullanılan tüp ya da flask başına maliyet, çalışma zamanı, mitotik indeks açılarından incelendi. Sırasıyla gelen 100 amniyotik sıvı örneğinden hem açık, hem de kapalı sistem kullanılarak hücre kültürü yapıldı. Açık sistemde hücre kültürleri için 25 cm 2 'lik doku kültür flaskı, %5 CO 2 ve %95 nemlendirilmiş hava karışımını sağlayacak inkübatörler, kapalı sistemde, 10 mL lik altı düz tüpler ve kuru etüvler kullanıldı. Açık sistemde penisilin/streptomisin ve L-Glutamin eklenmiş BioAmf, kapalı sistemde Hepes, L-Glutamin, penisilin-streptomisin, ultroser-G ve fetal calf serum eklenmiş F-10 "Ham's Nutrient Mixture" ile "Chang-D" karışımı besiyeri kullanıldı. 100 amniyotik sıvı örneğinden kapalı sistemde kültürü yapılanların tamamında hücre üremesi saptandı. Bunlardan bir tanesinde hücre üremesi saptanmasına rağmen yeterli sayıda ve kalitede metafaz elde edilemedi. Açık sistemde kültür yapılanların dördünde mantar enfeksiyonu gelişti. Yirmisekiz örnek çeşitli nedenlerle çalışmadan çıkarıldı. Çalışmanın yapıldığı dönem içinde açık sistemde bir flask başına yapılan harcama, kapalı sistemde bir tüp çalışmaya hazır hale gelinceye kadar tüp başına yapılan harcamaya göre 4 misli daha pahalı olarak bulundu. Açık sistemde ortalama mitotik indeks 10.46±12.76; kapalı sistemde 9.16±9.75 bulundu (p>0.05). Açık hücre kültürlerinde çalışmaya alınan 68 olguda çalışmaya başlayıncaya kadar geçen süre ortalama 14,00±4,55 gün, kapalı sistemde ise toplam 100 olguda 13,19±3,60 gün olarak bulundu. Besiyeri değişim sayısı açık sistemde toplam 68 olguda ortalama flask başına 2,33±1,33; kapalı sistemde ise toplam 100 olguda ortalama tüp başına 1,29±0,46'dı.