Intermedin/adrenomedullin 2'nin insan platelet agregasyonu üzerine in vitro etkileri

Suat DOĞANCI,Vedat YILDIRIM,Gökhan ÖZGÜR,Murat YILDIRIM,Zerrin ERTAŞ,Türker ÇETİN,BÜLENT GÜMÜŞEL,Ferit AVCU

Abstract

Intermedin/Adrenomedullin 2 (IMD/AM2) is a novel peptide related to the calcitonin gene-related peptide family. It is a vascular regulatory factor of homeostasis and a vital endogenous protective factor against vascular diseases. This in vitro study was designed to the effect of IMD/AM2 on platelet aggregation with several platelet aggregation agents in the healthy volunteers. The study was carried out on 7 healthy volunteers. Blood samples were centrifuged to prepare platelet-rich plasma and platelet-poor plasma. The platelet-rich plasma was diluted with the platelet poor plasma to yield test platelet-rich plasma with a final platelet count of 300,000±25,000 platelets L-9. Three concentration of IMD/AM2 solutions were prepared that would result in 10-8, 10-7, and 10-6 M. Each concentration of IMD/AM2 was incubated with platelet-rich plasma at 37 ?C during one hour. Platelet aggregation studies were carried out in platelet-rich plasma using 3?g ml-1 collagen, 10?M ADP, and 10?M epinephrine. In addition, spontaneous aggregation was performed for each concentration of IMD/AM2 incubated platelet-rich plasma. Compared to control, pre-incubation with all dilutions of IMD/AM2 had no detectable effect on platelet aggregation response induced collagen, ADP, epinephrine, and no detected spontaneous aggregation. The platelet aggregation amplitudes and slopes were statistically similar among all groups by the aggregation test. This in vitro study suggested that IMD/AM2 had no effect on platelet aggregation in a dose-dependent manner.

Özet

İntermedin/Adrenomedullin (IMD/AM2) kalsitonin genle ilişkili peptid ailesinin yeni bir üyesidir. Homeostaz için bir vasküler düzenleyici ve vasküler hastalıklara karşı önemli bir endojen koruyucu faktördür. Bu in vitro çalışma IMD/AM2'nin sağlık gönüllüler üzerinde çeşitli pletelet agregan ajanlar ile trombosit agregasyonu üzerinde etkisini araştırmak için tasarlanmıştır. Bu çalışma 7 sağlıklı gönüllü üzerinde gerçekleştirilmiştir. Kan örnekleri santrifüje edilerek trombositten zegin ve trombositten fakir plazma elde edildi. Trombositten zengin plazma, trombositten fakir plazma ile dilüe edilerek son trombosit sayısının 300,000±25,000 platelets L-9 olduğu trombositten zengin plazma elde edildi. IMD/AM2' nin 10-8, 10-7, and 10-6 M olacak şekilde 3 konsantrasyonu hazırlandı. IMD/AM2' nin her bir konsantrasyonu bir saat süreyle 37 ?C'de trombositten zengin plazma ile inkübe edildi. Trombosit agregasyon çalışmalara trombositten zengin plazma ile 3?g ml-1 kollajen, 10?M ADP ve 10?M epinephrine kullanılarak yapıldı. Ayrıca IMD/ AM2' nin her bir konsantrasyonu için spontan agregasyon trombositten zengin plazma inkübasyonu ile çalışıldı. Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında kollajen, ADP, epinefrin indüksiyonu ile IMD/AM2' nin tüm dilüsyonlarda yapılan preinkübasyonunun trombosit agregasyonu üzerine saptanabilir cevabı ile spontan agregasyon etkisi yoktur. Agregasyon testinde trombosit agregasyon amplitütleri ve eğrileri tüm gruplarda istatistiksel olarak birbirine benzerdir. Bu in vitro çalışma doz bağımlı bir şekilde IMD/AM2' nin trombosit agregasyonu üzerine etkisi olmadığını göstermiştir.