Journals / Etlik Veteriner Mikrobiyoloji Dergisi / 1995 / Cilt: 8 - Sayı: 1
The preparation of.reagents in Elisa techniques
- Pages
- 238–253
- DOI
- —
Abstract
The ELISA assay is an with antigen-antibody reaction system which uses an antibody coupled enzyme with the substrate in directly proportional to the amount of antibody or antigen present in the sample being tested. lmmunoassays are one of the most powerful of all immunochemical techniques. The next stage in the development of enzyme-immunoassays was the linkage of soluble antigensor antibody to an insoluble solid phase in a way in which the reactivity of the immunological component was retanied . This was the basis for the techniques known ELISA (Enzyme Linked lmmunoSorbent Assay) pioneered by Engvall and colleaques quick and easy, yielding information that would be difficult to determine by the othertechniques . (11 ,23) For this assay, a lot of diluents, buffers (coating, washing, substrate and conjugating buffers) antigens , conjugate , substrate and ext. are needed. In this study; these kind of solutions have been prepared, tested and standardized. According to demand, the ELISA reagents will be dispatched to Iaboratory all over the country.
Özet
Son zamanlarda soluble antijen veya antikorların enzim immuoassay ile solid faz hale getirilip teşhis . edilmesinde büyük gelişmeler kaydedilmiştir . immunoassay, diğer immunokimyasal tekniklerin en önemlilerinden biri olup aynı zamanda diğer tekniklerden daha az komplike, daha kolay ve daha çabuktur. ELiSA olarak bilinen enzim aracılığı ile antijen-antikor ölçülmesi tekniğine dayanan bu test Engvall ve arkadaşları , Van Weemen ile Schuurs tarafından bulunup geliştirilmiştir . (11 ,23) ELiSA yöntemi ile antikorların veya antijenlerin saptanmasında ortam ya antikor yada antijen ile kaplanarak duyarlaştırılır ve üzerine konan antijen veya antikor ile reaksiyona girer, üzerine ilave edilen enzim işaretli antiimmunoglobulin ve substrat ile renk değişimi şeklinde substratın parçalanma oranına göre test sonuçlandırılır ve mikropleytte oluşturulan bu reaksiyonda bir pleyt üzerinde çok sayıda numune i şlenebilir . Biz bu araştırmada bu test için gerekli olan reagentleri, konjugeyt, substrat ve konjugasyon solüsyonları üretimi olarak ele alıp ürettik vede laboratuvarımıza göre test edip standardizasyonunu gerçekleştirdik.