AI Summary & Key Takeaways
AI InsightSonuç: Bu çalışma, sKİ-MKH’lerinin uzun süreli kültüre edilmesinin bu hücrelerin farklılaşma potansiyelinde değişikliklere ve tümörijenik riskin artmasına neden olduğunu göstermiştir.
📌 3 Key Takeaways
Abstract
Amaç: Mezenkimal kök hücreler (MKH) in vitro uzun süreli ekspansiyon, adipojenik, osteojenik, kondrojenik, miyojenik ve nöral farklılaşma potansiyeline sahiptir. Çalışmamızın amacı uzun süre kültüre edilen sıçan kemik iliği (sKİ)-MKH’lerinin kök hücre niteliklerini, farklılaşma potansiyellerini, telomeraz aktivitelerini ve ultrayapısal özelliklerini belirlemektir. Gereç ve Yöntemler: 3., 50. ve 100. pasajlardan (P3, P50 ve P100) elde edilen sKİ-MKH’leri, immünohistokimya, revers-transkriptaz polimeraz zincir reaksiyonu, telomeraz aktivite analizleri ve elektron mikroskopi ile değerlendirilmiştir. Bulgular: P100’de miyojenik belirteçlerden aktin ve miyogenin seviyelerinde düşüş gözlemlenmiştir. Osteojenik belirteçler Coll1, osteonektin (Sparc) ve osteokalsin ile nöral belirteç c-Fos ve kondrojenik belirteç Coll2 P100’de P3 ve P50’ye kıyasla önemli ölçüde azalmıştır. Osteojenik belirteç kemik morfojenik protein-2 (BMP2) ve adipojenik belirteç peroksizom proliferatör ile aktive olan reseptör gamma (Pparγ) geç pasajlarda düşüş göstermiştir. Kök hücre belirteçlerinden Rex-1’in ekspresyonu P100’de düşüş gösterirken, Oct4 ekspresyonunun P50’de P3 ve P100’e göre düşüş gösterdiği belirlenmiştir. Uzun süre kültüre edilen hücrelerdeki artmış telomeraz aktivitesi tumorijenik riske işaret etmektedir. Elektron mikroskopik değerlendirmeler, uzun süre kültüre edilen sKİ-MKH sitoplazmasında düşük sayıda organel ve artmış oranda otofajik vaküol gibi utrayapısal değişiklikler ortaya koymuştur. Sonuç: Bu çalışma, sKİ-MKH’lerinin uzun süreli kültüre edilmesinin bu hücrelerin farklılaşma potansiyelinde değişikliklere ve tümörijenik riskin artmasına neden olduğunu göstermiştir.
Özet
Objective: Mesenchymal stem cells (MSCs) have the capacity forextensive expansion and adipogenic, osteogenic, chondrogenic,myogenic, and neural differentiation in vitro. The aim of our studywas to determine stemness, differentiation potential, telomeraseactivity, and ultrastructural characteristics of long-term cultured ratbone marrow (rBM)-MSCs.Materials and Methods: rBM-MSCs from passages 3, 50, and 100(P3, P50, and P100) were evaluated through immunocytochemistry,reverse transcription-polymerase chain reaction, telomerase activityassays, and electron microscopy.Results: A dramatic reduction in the levels of myogenic markersactin and myogenin was detected in P100. Osteogenic markers Coll1,osteonectin (Sparc), and osteocalcin as well as neural marker c-Fosand chondrogenic marker Coll2 were significantly reduced in P100compared to P3 and P50. Osteogenic marker bone morphogenicprotein-2 (BMP2) and adipogenic marker peroxisome proliferatoractivated receptor gamma (Pparγ) expression was reduced in latepassages. The expression of stemness factor Rex-1 was lower inP100, whereas Oct4 expression was decreased in P50 compared toP3 and P100. Increased telomerase activity was observed in longterm cultured cells, signifying tumorigenic risk. Electron microscopicevaluations revealed ultrastructural changes such as smaller numberof organelles and increased amount of autophagic vacuoles in thecytoplasm in long-term cultured rBM-MSCs.Conclusion: This study suggests that long-term culture of rBMMSCs leads to changes in differentiation potential and increasedtumorigenic risk.