AI Summary & Key Takeaways
AI InsightIn conclusion, we believe that in non-obstructive azoospermia cases when spermatozoa was not found by mechanical extraction technique, to continue the procedure with enzymatic digestion procedure yields more spermatozoa to be used in ICSI.
📌 3 Key Takeaways
Abstract
In 153 infertile patients with diagnosis of non-obstructive azoospermia secondary to primary testicular failure, microdissection testicular sperm extraction (TESE) was performed. In 55 of them (36%) at least one spermatozoa was obtained by mechanical extraction technique. In the remaining 98 patients with no spermatozoa was found by mechanic extraction, testicular tissue suspension were subjected to enzymatic digestion procedure placing in incubating medium containing 25 mg/ml Dnase to prevent clotting of the resulting cell suspension due to the release free DNA from dead cells, and 2.6 mg of collagenase type IV. In 19 (19%) at least one spermatozoa was found. In addition to its role in dissociation of collagen fibers in the lamina propria, collagenase may play a role in the translocation of germ cells and releasing of mature spermatozoa into the lumen of the seminiferous tubules during spermiation, and by that way, enzymatic digestion by collagenase could be superior to mechanical extraction for better cell retrieval. However, detailed investigation of the possible effects of the enzymes using in this procedure, on the fertilization capacities of germ cells is necessary. In conclusion, we believe that in non-obstructive azoospermia cases when spermatozoa was not found by mechanical extraction technique, to continue the procedure with enzymatic digestion procedure yields more spermatozoa to be used in ICSI.
Özet
İnfertilite yakınması ile başvuran ve yapılan tetkikleri neticesi primer testiküler yetmezliğe bağlı non-obstrüktif azoospermi tanısı konan 153 olguya mikroskopik testiküler sperm ekstraksiyonu (TESE) yapıldı. Bunların 55'inde (% 36) mekanik ayrıştırma ile en az bir spermatozoa elde edilebildi. Hücre bulunamayan 98 olguda ise hücre süspansiyonları daha sonra %1 HSA içeren HEPES'li Earle's mediumu içine, ölü hücrelerden açığa çıkacak serbest DNA'ya bağlı hücre süspansiyonundaki pıhtılaşmayı önlemek amacıyla 25 mg/ml Dnase ve 2.6 mg kollajenaz tip IV konularak hazırlanmış enzim solüsyonu içerisinde muamele edilerek tekrar spermatozoa araştırıldı. 19'unda (%19) daha en az bir spermatozoa bulunduğu görüldü. Kollajenazın lamina propriadaki kollagen liflerini ayrıştırıcı etkisi yanısıra, germ hücrelerinin germinal epitel içerisinde yer değiştirmesinde ve spermiasyon sırasında matür spermatozoaların lümene salınmasındaki rolü nedeniyle, mekanik ayrıştırmaya göre daha fazla hücre elde edilmesini sağla ması mümkündür. Ancak, kullanılan enzimlerin germ hücrelerinin fertilizasyon kapasiteleri üzerine etkilerinin geniş olarak araştırılması gerekmektedir. Sonuç olarak, non-obstrüktif azoospermi olgularında, mekanik ayrıştırma ile TESE yapılan olgularda spermatozoa bulunamaması durumunda işleme enzimatik ayrıştırma yöntemi ile devam edilmesinin ICSI'de kullanılmak üzere daha fazla hücre bulunmasını sağlayabileceği kanısına varılmıştır.