LAETIPORUS SULPHUREUS (BULL.) MURRILL’UN SİTOTOKSİTE, APOPTİK VE NEKROTİK ETKİLERİ

Özet

Çalışmada, Laetiporus sulphureus’un sitotoksite, apoptik ve nekrotik etkileri incelenmiştir. Laboratuvardaki basidiokarplardan alınan parçalar malt ekstrakt agarda doku kültürü yöntemiyle geliştirildi. Primer ve sekonder miseller 27°C’de, karanlıkta, 10 gün süreyle inkübe edilerek elde edildi. Sekonder misellerden 3’er pelet nutrientbroth’da 27°C’de, 140 rpm’de 7 günde gelişimini tamamladı. Numuneler soxlet cihazında 80°C, %70’lik etil alkolde 1 saat ekstraksiyon edilerek sitoksite, apoptik ve nekrotik çalışmalar için hazırlandı. Sitoksite çalışmalarında, ekstrakt MCF-7 ve L929 Fibroblast hücrelere örnek konsantrasyonları 0.5mg/ml, 0.25mg/ml, 0.125mg/ml,0.0625mg/ml, 0.03125mg/ml olarak uygulandı. WST-1 solüsyonu eklenerek inkübasyon sonucunda 440nm dalga boyunda mikroplate okuyucuda absorbans ölçümü yapıldı. İkili boyama deneyi ile aynı hücre hattında apoptoz ve nekroz belirlendi. İkili boyama solüsyonu hazırlanarak MCF-7 ve L929 Fibroblast hücrelere aynı konsantrasyonlarda uygulandı. İnkübasyon sonucunda florasanataçmanlı mikroskop FITC ve DAPI filtresinde 20X büyütmede ölçüm yapıldı. Kullanılan 0.25 dozajda MCF-7 hücre hatlarında %10 sitotoksitite gözlenmiş. Kullanılan tüm dozajlarda L929 Fibroblast hücre hatlarında canlılık oranları artmıştır. Örneklerde apoptik ve nekrotik etki gözlenmiştir.