SUILLUS COLLINITUS (FR.) KUNTZE’UN SİTOTOKSİTE, APOPTİK VE NEKROTİK ETKİLERİ

Özet

Çalışmada, Suillus collinitus’un sitotoksite, apoptik ve nekrotik etkileri incelenmiştir. Kuru basidiokarplardan alınan parçalar malt ekstrakt agarda doku kültürü yöntemiyle geliştirildi. Sırasıyla primer ve sekonder miseller 27°C’de, karanlıkta, 10 gün süreyle inkübe edilerek elde edildi. Sekonder misellerden 5’er pelet nutrient broth’da 27°C’de, 140 rpm’de 7 günde gelişimini tamamladı.Numuneler soxlet cihazında 80°C, %70’lik etil alkolde 1 saat ekstraksiyon edilerek sitoksite, apoptik ve nekrotik çalışmalar için hazırlandı. Sitoksite çalışmalarında, ekstrakt MCF-7 ve L929 Fibroblast hücrelere örnek konsantrasyonları 1mg/ml, 0.5mg/ml, 0.25mg/ml olarak uygulandı. WST-1 solüsyonu eklenerek inkübasyon sonucunda 440 nm dalga boyunda mikroplate okuyucuda absorbans ölçümü yapıldı. İkili boyama deneyi ile aynı hücre hattında apoptoz ve nekroz belirlendi. İkili boyama solüsyonu hazırlanarak MCF-7 ve L929 Fibroblast hücrelere aynı konsantrasyonlarda uygulandı. İnkübasyon sonucunda florasanataçmanlı mikroskop FITC ve DAPI filtresinde 20X büyütmede ölçüm yapıldı. Toksite, konsantrasyonlara bağlı olarak değişmektedir. 0.5mg/ml konsantrasyonda %86 oranında toksik etki göstermiştir. Konsantrasyon azaldıkça toksite de azalmıştır. Fibroblastlara yapılan uygulamada ise uygulanan tüm konsantrasyonlarda toksik etki göstermediği tespit edilmiştir.