Dergiler / Journal of Clinical and Analytical Medicine / 2011 / Cilt: 2 - Sayı: 2
Rat plazma örneklerinde yüksek basınçlı sıvı kromatografisi (HPLC) ile yeni bir monopiridinyum oksim olan TS-131’in ölçümü
- Sayfa
- 19–21
- DOI
- —
Özet
Amaç TS-131, mevcut ticari oksimlere potansiyel bir alternatif olarak geliştirilmiş bir monopiridinyum aldoksim tipi kolinesteraz reaktivatörüdür. Rat plazma örneklerinde TS-131’in konsantrasyonlarının ölçümü için; sensitif, basit ve güvenilir bir yüksek basınçlı sıvı kromatografisi (HPLC) yöntemi kurmayı amaçladık. Gereç ve Yöntemler TS-131, erkek Sprague Dawley ratlara intramusküler olarak verildi. 30 dakika sonra kan örnekleri intrakardiyak olarak alındı. TS-131’in HPLC ile ayırımı için, octadecyl silica yapısında analitik kolon ve %92 0.1 M amonyum asetat ve %8 metanol içeren mobil faz kullanıldı. Tüm analizler 40 0C’ye ayarlanmış kolon fırını içerisinde yapıldı. Analizler, diyot array dedektör ile 242 nm dalga boyunda yapıldı. Bulgular 3200 μmol/L’lık stok standarttan seri dilüsyonlarla elde edilen standartlarla (0.78–3200 μmol/L) hesaplanan kalibrasyon eğrisi lineerdi. Bu HPLC yöntemi ile dedekte edilebilen TS-131 aralığı 0.78–3200 μmol/L arasında idi. Yöntemin kantitasyon limiti (LOQ)’u 0.39 μmol/L’ydi. HPLC ölçümlerinin gün-içi ve günler-arası tekrarlanabilirlilikleri sırasıyla %1.94 ve %1.22 idi. Standartın numunelere eklenmesinden (spiking) sonra, ortalama spike geri eldeleri %99.2 ile %100.4 arasındaydı. Ortalama geri elde ise %99.8 olarak bulundu. Sonuç TS-131 ölçümü için; sensitif, basit ve güvenilir bir HPLC yöntemi kuruldu. Mevcut diyod array dedektörlü HPLC yöntemi, aynı zamanda çeşitli piridinyum oksimlerin konsantrasyonlarını belirlemek için de kullanılabilir.
Abstract
Aim TS-131 is a monopyridinium aldoxime-type cholinesterase reactivator developed as a potential alternative to commercially available oximes. A sensitive, simple and reliable high performance liquid chromatography (HPLC) method with diode array detector was developed for the measurement of TS- 131 concentrations in rat plasma samples. Material and Methods Male Spraque Dawley rats were treated intramuscularly with TS-131 and the samples were collected 30 min. later. Separation was carried out by HPLC using octadecyl silica stationary phase and a mobile phase consisting of 92% 0.1 M ammonium acetate and 8% methanol. Measurements were carried out at 40 0C. Quantitative absorbance was monitored at 242 nm. Results The calibration curve was linear through the range of 0.78–3200 μmol/L, which is well beyond the detected plasma level range of TS-131. Limit of quantitation was 0.39 μmol/L. Intra-day and inter-day precisions of the HPLC determinations gave standard deviations as 1.94 and 1.22%, respectively. After spiking, average spike recoveries ranged from 99.2% to 100.4% and, overall mean recovery of 99.8% was found. Conclusion A sensitive, simple and reliable HPLC method was established for the measurement of TS-131. The presented HPLC method with diyote arrray detector can also be used to determine the concentrations of several pyridinium oximes.