Marmara Bölgesi’ndeki süt işletmelerindeki ineklerde ve çevrede E. coli O157:H7 varlığının saptanması

Prevalence of E. coli O157:H7 in Dairy Cattle and the Farm Environment in the Marmara Region of Turkey

Özet

Bu çalışmada, Marmara Bölgesinde kamu ve özel sektöre ait süt işletmelerinde bulunan çeşitli yaş gruplarındaki sağlıklı ineklerin dışkı ve sütlerinde, çiftlikte bulunan diğer hayvanların (köpek, kedi vs) dışkılarında ayrıca işletmelere ait çevresel örneklerde E. coli O157:H7’nin varlığının saptanması, mevsimsel olarak prevalansının belirlenmesi amaçlandı. Bu amaçla belirlenen 10 süt sığırcılığı işletmesinden sonbahar ve ilkbahar dönemlerinde aynı hayvanlardan (ölüm ve kesim dışında) ve çevresel örneklerden tesadüfî örnekleme ile 96’şar adet dışkı, süt ve çevre örneği toplandı. Birinci dönem 288, ikinci dönem 288 olmak üzere toplam olarak 576 örnek incelendi. Her iki dönemde ölüm ve kesim nedeniyle çalışmaya yeni dâhil edilen inekler ile toplamda 139 ineğe ait örnek incelendi. Örnekler Modifiye Triptic Soy Buyyon’da zenginleştirildi. İmmunomanyetik Seperasyon ve ardından O157 Dynabead ve bakteri kompleksi içeren örneklerden sefiksim ve tellurit ilave edilen Sorbitollü MacConkey agara ekim yapıldı. Sorbitol negatif koloniler yeniden 4-methylumbelliferyl-β-D-glucuronide Sorbitollu MacConkey agara ekildi. Bu besiyerlerinde üreyen şüpheli koloniler seçildi ve bunlara sırasıyla O157 serogrubunun tanımlanması için tüp ve lateks aglütinasyon testleri, biyokimyasal testler ve H7 antijenlerinin saptanması için tüp aglütinasyon testi uygulandı. Sonuç olarak, sonbahar döneminde toplanan 288 örnekten çevresel kaynaklı bir örnekte E. coli O157, dışkı kaynaklı bir örnekte E. coli O157:H7 izole ve identifiye edildi. İlkbahar döneminde toplanan 288 örneğin dışkı kökenli 10’unda E. coli O157 ve dışkı kökenli birinde E. coli O157:H7 izole ve identifiye edildi. E. coli O157 identifiye edilen örneklerin 7’si aynı çiftliğe ait, ilk örneklemede negatif olarak bulunan ineklerdi. Toplam olarak incelenen 576 örneğin iki (%0.35)’sinde E. coli O157:H7 izole ve identifiye edildi. Sonbahar döneminde E. coli O157:H7 identifiye edilen dışkıdan, ilkbahar döneminde E. coli O157:H7 izole edilmedi. İlkbahar döneminde dışkısından O157:H7 identifiye edilen hayvan, sonbahar döneminde rastgele seçilen hayvanlar arasında yer almaması nedeniyle örnek alınmayan, ikinci örneklemede kesime giden hayvanların yerine rastgele seçilen yeni hayvanlardan biriydi. Yapılan istatistiksel analizler sonucunda sadece dışkıda mevsimsel olarak O157 izolasyon oranı önemli bulundu (p

Abstract

In this study; identification and determination of seasonal prevalence of E. coli O157:H7 from feces and milk in the healthydairy cattle that were different age groups, and other animals’ feces (dog, cat etc.) which were present in the farms. Also environmental samples(barn, calf shelter, paddock, open space, parlor floor, milk tank, calf pads, feed bunk, tractor wheels, a lounge, a nursery, parlor door, barndoor, milking parlor door, a nursery wall, cows, ducks and geese drinking water, trough, watering, milk jug, milking machine head, dog kennel,milk cooling tanks, vacuum machine, foot pool, calf bottle, scan, brush, straw bales, shovel and cat, dog paw, dog, lamb and calf feces) of thefarms which are public or private establishments, in the Marmara Region of Turkey were included. In this research, 96 fecal and milk samplesfrom the same animals (except death and slaughtering) and 96 environmental samples were collected from the determined 10 farms, in fall andspring periods. Total of 576 (288 samples in the fall period and 288 samples in the spring) samples were examined. The samples were collectedtotally from 139 animals because of the new animals were added due to death or slaughtering in the spring period. All samples were enriched inmodified Tryptic Soya Broth. After the immunomagnetic separation, O157 Dynabeads and bacterial suspensions were inoculated onto sorbitolMacConkey agar with cefixime and tellurite. Sorbitol negative colonies were inoculated onto sorbitol MacConkey agar supplemented with 4-methylumbelliferyl-β-D-glucuronide. Suspected colonies which were chosen from this medium were applied for latex and tube agglutinationassays for characterization of O157 serogroup, biochemical tests and tube agglutination assay for detecting H7 antigen respectively. In the fallperiod, E. coli O157 was isolated from one environmental sample and one fecal sample. In the spring period, E. coli O157 was isolated from 10and E. coli one fecal sample. Seven E. coli O157 isolates were collected from the same farm which tested negative during in the first sampling.In total, 576 samples were examined and two samples were identified as E. coli O157:H7 (0.35 %) and confirmed by PCR assay applied on theBAX System Q7. E. coli O157:H7 was identified in the fall period while didn’t isolate in the spring period. Seasonal effect was detectedsignificant only in the isolation rate of E. coli O157 in feces (p