Dergiler / Hacettepe Fen ve Mühendislik Bilimleri Dergisi Seri C: Kimya / 1996 / Cilt: 17 - Sayı:
Kısmi saflaştırılmış salatalık (Cucumis sativus L.) askorbat oksidazının aktivite tayini için yeni bir titrimetrik yöntem
- Sayfa
- 135–145
- DOI
- —
Özet
Çeşitli gıdalarda, meyve sularında, meyve ve sebzelerde, vitamin tabletlerinde ve bazen de fizyolojik sıvılarda L-askorbik asit (C-vitamini) tayini büyük önem taşımaktadır. Günümüzde L-askorbik asit yaygın bir şekilde gıda maddelerine katkı maddesi ve antioksidan olarak ilave edilmektedir. Özellikle bu durum C-vitamininin tayini üzerinde kapsamlı çalışmalar yapılmasına neden olmaktadır. Son yıllardaki çalışmalar L-askorbik asidi girişim etkilerinden etkilenmeksizin spesifik bir şekilde tayin etmek için, askorbat oksidazın kullanıldığı enzimatik yöntemler üzerinde yoğunlaşmaktadır. Bu çalışmada, yukarıda sözü edilen amaç çerçevesinde kullanılacak askorbat oksidazın (EC 1.10.3.3) salatalıktan (Cucumis sativus L.) pratik ve ekonomik bir şekilde izolasyon ve kısmi saflaştırılması gerçekleştirildi. Kısmi saflaştırılmış askorbat oksidaz aktivitesinin tayini için L-askorbik asit tayininde kullanılan DCIP yöntemi modifiye edilerek yeni bir titrimetrik yöntem geliştirildi.
Abstract
The determination of L-ascorbic acid (Vitamin C) in various foodstuffs, soft drinks, fruit and vegetables, vitamin tablets and rarely in physiological fluids is of great importance. Nowadays, L-ascorbic acid is widely used as an additive and antioxidant for foodstuffs. Consequently, extensive investigations about Vitamin-C determination have been succeeded. Recent studies have been concentrated on the enzymatic methods in which ascorbate oxidase has been used in order to develop a special method for L-ascorbic acid in the presence of interfering substances. In this work, ascorbate oxidase, which will later be used for the purposes mentioned above, was isolated from cucumber (Cucumis sativus L.) by developing an economic and practical method. The partially purification of ascorbate oxidase was carried out and a new titrimetric method has been developed by the modification of DCIP method, used for L-ascorbic acid analyses to determine the activity of ascorbate oxidase.