İnflamatuvar uyaranların mikroglial TRAIL ekspresyonu üzerine etkisi

Özet

Son yıllarda yapılan çalışmalar merkezi sinir sisteminin makrofajları olan mikroglial hücrelerin Alzheimer Hastalığı (AH) ve Parkinson hastalığı gibi kronik nörodejeneratif hastalıkların patogenezine katkıda bulunduğunu göstermiştir. Kronik nörodejenerasyon sürecinde aktive duruma geçen mikroglial hücreler salgıladıkları nörotoksik faktörler aracılığıyla nöronal hasara yol açmaktadır. Bu faktörler yanısıra Tümör Nekrozis Faktör (TNF) ailesinden olan TNF-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL) gibi hücre ölüm ligandları da mikroglia aracılıklı nörotoksik etkiye aracılık ediyor olabilir. TRAIL'in monositer seri hücrelerinde inflamatuvar uyaranlarla indüklenen ekspresyonunun bulunduğu ve sitotoksik etkilerine aracılık ettiği saptanmıştır. Bu çalışmada N9 fare mikroglial hücre hattı hücrelerinde in vitro bazal ve inflamatuvar uyaranlarla [lipopolisakkarid (LPS) ve interferon gamma (IFNg)] indüklenebilen TRAIL proteini ve mRNA ekspresyonu araştırıldı. Protein ekspresyonu için immünpresipitasyon -immunoblotting, mRNA ekspresyonu için Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) yöntemleri kullanıldı. Çalışmanın sonuçları N9 hücrelerinde bazal TRAIL protein ve mRNA ekspresyonunun bulunduğunu ve bu ekspresyon düzeylerinin LPS ve IFNg uyarımıyla arttığını gösterdi. Her iki ajanın TRAIL proteini ve mRNA ekspresyonunu indükleyici etkisinin sinerjistik olduğu bulundu. Bu sonuçlar N9 mikroglial hücre hattı hücrelerinde bazal ve inflamatuvar uyaranlarla indüklenebilir TRAIL protein ve mRNA ekspresyonunun varlığını işaret etmektedir. İnflamatuvar koşullarda aktive olan mikroglial hücrelerde artış gösteren TRAIL bu hücrelerin hedef hücreler üzerine sitotoksik etki oluşturmalarına katkıda bulunuyor ve nörodejeneratif süreçlerde rol oynuyor olabilir.

Abstract

Recent studies showed that microglial cells which are macrophages of central nervous system, contribute to the pathogenesis of chronic neurodegenerative disorders such as Alzheimer's disease (AD) and Parkinson's disease. Microglia activated in chronic neurodegeneration process result in neuronal injury by secreted neurotoxic factors. In addition to these soluble factors, cell death ligands such as Tumor Necrosis Factor (TNF)-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL) from TNF superfamily might mediate microglia-induced neurotoxicity. It has been found that monocyte lineage cells express basal and inflammatory stimuli-induced TRAIL and this molecule mediates their cytotoxic effect. In this study, basal and iflammatory stimuli [lipopolysaccharide (LPS) and interferon gamma (IFNg)]-induced TRAIL expression has been investigated in N9 murine microglial cell line in vitro. Immunoprecipitation-immunoblotting for protein expression and Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) for mRNA expression have been used. Results of study showed that basal TRAIL and mRNA expression exist and these expression levels increase by LPS ve IFNg stimulation in N9 cells. It has been found that both agents have synergistic inducing effect on TRAIL protein and mRNA expression. These results point the presence of basal and inducible TRAIL protein and mRNA expression in N9 microglial cell line. TRAIL that is increased on microglial cells activated in inflammatory conditions might be involved in cytotoxic effect of these cells on target cells and play role in neurodegenerative process.