Streptozotosin ile Diyabet Oluşturulmuş Sıçan Pankreasında Resveratrol Kullanımına Bağlı Proinflamatuar Gen İfadelenmelerinin Araştırılması

Effect of Resveratrol on Proinflammatory Gene Expression in Pancreas of Streptozotocin Induced Diabetic Rats

Özet

Amaç: İnflamasyon ve oksidatif stres, Diabetes mellitus (DM) gelişiminde önemli bir rol oynamaktadır. Oksidatif strese karşı duyarlı hücreler olan ß- hücrelerde artmış reaktif oksijen türlerinin üretim düzeyleri insülin salınımında bozulmalara, tip 2 DM’ye ve insülin direncine yol açmaktadır. Streptozotosin (STZ), pankreasta superoksit dismutazı inhibe ederek serbest radikallerin birikimiyle ß hücreleri yıkıma uğratmaktadır. Resveratrol (RSV) ise pankreatik ß hücrelerindeki bozulmayı inhibe edici bir etkiye sahiptir. Çalışmamızda, STZ ile diyabet oluşturulmuş sıçanlarda RSV’nin pankreasta NF-κB, TNFα, IL-6, iNOS ve COX2 genlerinin ifadelenmesinin DM’nin komplikasyonları üzerine etkisini araştırmayı amaçladık. Yöntem: STZ ile diyabet oluşturulmuş ve diyabet oluşturulduktan sonra RSV uygulanmış sıçanlara ait pankreas dokuları kullanıldı. Bu dokulardan RNA izolasyonu ve cDNA sentezi yapıldı. NF- κB, TNFα, IL-6, iNOS ve COX2 genlerinin mRNA ifadelenme düzeyleri gerçek zamanlı PZR reaksiyonu ile gerçekleştirilerek sonuçlar istatistiksel olarak değerlendirildi. Bulgular: Kontrol ile sham kontrol ve kontrol+DMSO grupları arasında COX2, iNOS, NF-κB, TNFα ve IL-6 mRNA düzeyinde anlamlı bir fark gözlenmedi. Kontrol ile diyabet grubu karşılaştırıldığında COX2, iNOS, NF-κB, TNFα ve IL-6 genlerinin mRNA düzeylerinde, diyabet grubunda hedef genlerin mRNA ifadelenme düzeylerinde artış olduğu gözlendi ve bu iki grup arasında istatistiksel olarak anlam bulundu. Diyabet ile diyabet+RSV grubu karşılaştırıldığında ise COX2, iNOS, NF-κB, TNFα ve IL-6 genlerinin mRNA düzeylerinde bir azalma gözlenirken, bu azalışın istatistiksel açıdan anlamlı olmadığı gözlendi. Sonuç: Elde ettiğimiz veriler, diyabetik sıçanlarda inflamatuar genlerin ifade düzeylerinde artış olduğunu ve RSV uygulamasının bu genlerin ifade düzeyleri üzerinde istatistiksel olarak anlamlı bir etkisinin olmadığını göstermektedir. Buradan hareketle sadece RSV uygulamasının diyabetle ilişkili inflamatuar genlerin ifade düzeylerini değiştiremeyeceği söylenebilir.

Abstract

Objective: Inflammation and oxidative stress play an important role in thedevelopment of Diabetes mellitus (DM). The production amount of increasedreactive oxygen types in ß-cells that are sensitive to oxidative stress causedegeneration in insulin release and insulin resistance in Type 2 DM.Streptozotocin(STZ) breaks down ß-cells with the accumulation of free radicalsby inhibiting pancreas superoxide dismutase. And Resveratrol (RSV) has aninhibitory effect on the degenaration of pancreatic ß cells. In this study, weaimed to examine the impact of expressions in NF-κB, TNFα, IL-6, iNOS andCOX2 genes in STZ-induced diabetes in pancreases of rats on the complicationsof DM.Methods: STZ-induced diabetes in pancreases of rats and RSV appliedpancreatic tissues of rats after inducing diabetes are used. RNA isolation andcDNA synthesis are conducted for these tissues. mRNA expressions of NF-κB,TNFα, IL-6, iNOS and COX2 genes are realized with real-time PCR reaction andresults are evaluated statistically.Results: No significant difference is observed between control, sham controland control+DMSO groups on COX2, iNOS, NF-κB, TNFα and IL-6 in mRNAlevel. When control and diabetes groups are compared, it is observed thatmRNA levels of COX2, iNOS, NF-κB, TNFα and IL-6 genes increased in mRNAexpression levels of target genes in diabetes group. This presents a statisticalmeaning between two groups. And when diabetes and diabetes+RSV groupsare compared, decrease in COX2, iNOS, NF-κB, TNFα and IL-6 genes areobserved in mRNA levels. It is observed that this decrease is not statisticallymeaningful.Conclusion: Data obtained shows that there is decrease in expression levels ofinflammatory genes in diabetic rats and RSV application has no statisticallysignificant effect on expression levels of these genes. From this point of viewit can be said that only RSV application cannot change the expression levels ofinflammatory genes associated with diabetes.