Dergiler / Fırat Üniversitesi Sağlık Bilimleri Veteriner Dergisi / 2015 / Cilt: 29 - Sayı: 1
Ratlara uygulanan kurşun asetatın karaciğer arginazına etkisi ve enzimin bazı kinetik özellikleri
- Sayfa
- 37–43
- DOI
- —
Özet
Kentlerde bulunan endüstriyel artı klar ve motorlu araç egsozları ndan yayı lan kurş un (Pb) çe ş itlisa ğ l ı k problemlerine yol açmaktad ı r. Kent ya ş am ı nda ve kurş un kullan ı lan endüstri dalları ndakurş una maruziyet sonucu akut veya kronik zehirlenmeleri görülmektedir. Üre siklusunun sonbasama ğ ı n ı katalize eden arginaz arginini ornitin ve üreye hidrolize eden bir enzimdir. Arginazaktivitesinin en yüksek oldu ğ u organ karaci ğerdir ve arginaz, memeli karaci ğ erinde amonya ğ ı ndetoksifikasyonundan da sorumlu bir enzimdir. Bu çal ı ş mada; kurş un asetatı n rat karaci ğ er dokuarginazı üzerine olan etkisi ve enzimin baz ı kinetik özellikleri ara ş tı rı lmas ı amaçlanm ı ş tı r. Buamaçla, 8 haftal ı k 250±20 g a ğ ı rl ı ğ ı nda, 28 adet erkek Wistar cinsi rat dört gruba ayrı ld ı . Grup-I;kontrol grubu, Grup-II; 25 mg/kg kurş un asetat uygulanan grup, Grup-III; 50 mg/kg kurş un asetatuygulanan grup, Grup-IV; 75 mg/kg kurş un asetat uygulanan grup. Kurş un asetat Grup II, III,IVdeki ratlara 1 mL serum fizyoloji içinde 7 gün boyunca sabah ak ş am intraperitonal (i.p) olarakuyguland ı . Deney sonunda tüm gruplardaki ratlar anestezi altı nda dekapite edildi, karaci ğ erdokuları al ı nd ı ve spektrofotometrik yöntemlerle arginaz aktiviteleri ve enzimin bazı kinetiközellikleri çal ı ş ı ld ı . Kontrol ve kurş un asetat içeren denek grupları nda karaci ğ er doku arginazı içinpreinkübasyon ı s ı s ı 65°C, preinkübasyon zaman ı 20 dakika, inkübasyon zaman ı 18 dakika veoptimum pH: 10 olarak saptand ı . Enzimin en yüksek aktiviteyi 3 mM MnCl 2 konsantrasyonundaverdi ğ i belirlendi. Arginaz enziminin aktivasyonu için Mn +2 iyonları n ı n ve 65°Cde preinkübasyonungerekli oldu ğ u tespit edildi. 50mg/kg kurş un asetat içeren rat karaci ğ er doku arginazı n ı n L-argininekarş ı olan Kminin 8.5 mM, kontrol grubunun ise 11.5 mM civarı nda oldu ğ u bulundu ğ u ve Pbvarl ı ğ ı nda Km ve Vmax ı n azald ı ğ ı gözlendi ve meydana gelen inhibisyonununun kompetatif oldu ğ usaptand ı . Ayrı ca uygulanan kurş un miktarı arttı kça arginaz aktivitesinin azald ı ğ ı tespit edildi.
Abstract
The lead spreading from the industrial wastes and exhaust of the motor vehicles causes varioushealth problems. The occurance of chronic and acute poisioning is observed as a consequence oflead exposure in industrial branches in urban life. Arginase which is thelast enzyme of the ureacycle is responsible for the detoxification of ammonia in mammals by hydrolysing arginine toornithine and urea. Also the liver is the organ which has the highest arginase activity. The aim ofthis study was to find out some kinetic properties of rat liver arginase applied lead acetate. In thisstudy, 28 Wistar albino male rats were used with the weight of 250±20 grams and approximately 8weeks old, and divided 4 groups; Group-I: Control group,1 mL physiological-saline-solution/i.p,Group-II: Lead-acetate 25 mg/kg-i.p, Group-III: Lead-acetate 50 mg/kg-i.p, Group-IV: Lead-acetate75 mg/kg ip. The lead-acetate was added into 1 mL physiological saline solution within 7 days, itwas applied twice a day (morning-eveninig) intraperitoneally. At the end of the experiment, the ratsin all groups were sacrificed by using the anesthesia and liver tissues were taken. Thepreincubation temperature for rat liver tissues was determined at 65°C and the preincubation timeat 20 minutes, incubation time at 18 minutes and optimum pH at 10. It was observed that theenzyme showed the highest activity of 3 mM MnCI 2 concentration. As a result, it was determinedthat Mn +2ions and preincubation at 65°C is required for the activation of the enzyme. It wasobserved that Km of the rat liver which was opposite to L-arginine of tissue arginase including lead- acetate 50 mg/kg-i.p was aproximately 8.5 mM and control group was a proximately 11.5 mM. As aresult, it was observed that decreasing Km and Vmax in the presence of Pb caused uncompetitiveinhibition. Besides it was determined that when the amount of lead-acetate increased the arginaseactivity decreased.