Dergiler / Fırat Üniversitesi Sağlık Bilimleri Dergisi / 1997 / Cilt: 11 - Sayı: 2

Sığırlarda abti-paeainfluenza 3 virus antikorların belirlenmesinde enzime bağlı İmmunosorbent testi (Elisa)'nin geliştirilmesi ve kullanımı

Development and utilization of an enzyme-linked Immunosorbent assay for detection of bovine anti-parainfluenza-3 antibodies

Mehmet Z. DOYMAZ, Aykut ÖZDARENDELİ, Hakan BULUT, Yusuf BOLAT

Sayfa
277–282
DOI
—

Özet

Bu çalışmada, sığır anti parainfluenza-3 (PI-3) antikorlarım test etmek amacıyla bir Enzime Bağlı immunosor­bent Deneyi (ELISA) geliştirildi. Bu amaçla Elazığ bölgesinden Mayıs-Ağustos 1994 tarihleri arasında 238 sığır seru­mu toplandı ve serolojik deneylerde kullanıldı. Enzime Bağlı İrnmunosorbent Testi (ELISA)'nin yanında, Örnekler He-maglutinasyon İnhibisyon (HI) ve Serum nötralizasyon (SN) deneylerinde de test edildi. Deneylerde kullanılan PI-3 SF-4 susu Madin Darby Bovine Kidney (MDBK) hücre kültürlerinde üretildi ve kısmı bir saflaştırmadan sonra ELI-SA'da viral antijen olarak kullanıldı. Serum nötralizasyon deneyleri PI-3 ile enfekte MDBK hücre kültürlerinde ger­çekleştirildi. Hemaglutinasyon İnhibisyon testi için % l'lik kobay kırmızı kan hücreleri kullanıldı. Çalışmada kullanılan serolojik testlerin hepsi, örneklerin % 80' inden fazlasında anti-PI-3 antikorlarının varlığı­nı ortaya koymuş bulunmaktadır. Serolojik testler arasında ortaya çıkan duyarlılık farkları belirgin olmamasına rağ­men, HI ve ELISA metodları daha duyarlı görünmektedir. Para-İnfluenza-3 virus enfeksiyonlarının serolojik teşhisle­rinde, HI testine ek olarak ELISA testi de duyarlılığı, kolaylığı ve pratikliği gibi nedenlerle tercih edilebilir. Bu sonuçlar, ayrıca Elazığ yöresindeki sığır populasyonunda PI-3 virus enfeksiyonunun oldukça yaygın olduğu­ nu da ortaya koymaktadır.

Abstract

In this study, an experimental ELISA method was developed to test bovine anti-parainfluenza-3 (PI-3) antibodi­es. For this purpose, 238 cattle serum samples were collected from Elazığ region between the monhts of May and Au­gust in 1994, and used in the serological assays.Along with ELISA,serum samples were tested with hemagglutination-inhibition (HI) and serum neutralization (SN) assays. SF-4 strain of PI-3 were grown in MDBK cell culture and, after a partial purification, used in ELISA as viral antigen. SN assays were carried out on PI-3-infected MDBK cell cultures. For HI tests, 1 % Guinea pig red blood cells were used. According to the results, all three serological assays detected anti PI-3 antibodies in over 80 % of the samples. Although differences were marginal, ELISA and HI methods seem to be more sensitive in detecting anti-PI-3 antibodi­es in bovine serum than SN. During serological diagnosis of PI-3 infections, along With HI,ELISA, because of its simplicity, praticality and sensitivity, should seriously be considered. These results also indicate that PI-3 infection is rather prevalent in Elazığ region.