Dergiler / Eklem Hastalıkları ve Cerrahisi Dergisi (Eski Adı: Artroplasti Artroskopik Cerrahi Derg.) / 2005 / Cilt: 16 - Sayı: 1

Apoptosis of primary osteoblasts induced by dexamethasone: Cellular and molecular mechanisms

Deksametazonun primer osteoblast apopitozundaki rolü: Hücresel ve moleküler mekanizmalar

Nirong BAO, Jiannig ZHAO, Yurong WANG, Sujia WU, Xiaofeng ZENG, Junhua WANG

Sayfa
55–61
DOI
—

Özet

Amaç: Glikokortikoidlerin osteoblast hücrelerinin canlılığı üzerine etkisi incelendi ve osteoblast apopitozu sürecinde hücresel ve moleküler mekanizmalardaki rolü araştırıldı. Gereç ve yöntem: Deksametazon, yenidoğan farelerin kranyal kemiklerinden elde edilen primer kültürde üretilen osteoblast-benzeri hücrelerde apopitoz oluşturmak amacıyla kullanıldı. Osteoblastların canlı kalma ve apopitoz oranları, caspase-3 etkinliği ve nükleer faktör-kappa B'nin DNA bağlanma aktivitesi MTT-boya redüksiyonu mikrotesti, akım sitometrisi, kolorimetrik substrat testi ve elektroforetik mobilite şift testi ile ölçüldü. Deksametazonun hücrelere etkisindeki farklılıkları değerlendirmek amacıyla osteoblast ve fibroblastlann canlı kalma oranlan karşılaştırıldı. Bulgular: Deksametazonun, yoğunluk ve zamana bağlı olarak, apopitoz sürecinde osteoblast benzeri hücrelerin canlı kalma oranını anlamlı derecede düşürdüğü, hücresel caspase-3 aktivasyonunu artırdığı ve nükleer faktör-kappa B etkinliğini baskıladığı gözlendi (p

Abstract

Objectives: We investigated the effect of glucocorticoids on cell viability of osteoblasts and explored the cytological and molecular mechanisms of osteoblast apoptosis induced by glucocorticoids. Materials and methods: Dexamethasone was used to induce apoptosis of primary cultured osteoblast-like cells from skulls of suckling mouse. Surviving rate of osteoblasts, apoptosis rate, activity of caspase-3, and DNA binding activity of nuclear factor-kappa B were assessed using MTT-dye reduction microassay, flow cytometry, colorimetric substrate assay and electrophoretic mobility shift assay. The surviving rates of osteoblasts and fibroblasts were also compared to assess the differences in dexamethasone-induced effects on cells. Results: Dexamethasone significantly decreased the survival rate of osteoblast-like cells through an apoptotic process, activated cellular caspase-3, and inhibited the activity of nuclear factor-kappa B, in a concentrationand time-dependent manner (p