Triple Negatif Meme Kanseri Hücre Dizilerinde Nrf 2 Yolağı İnhibitörü ML 385 ve İmidazol Kombinasyonunun Hücre Canlılığı Üzerine Olan Etkileri

Effects of Combination of Nrf 2 Pathway Inhibitor ML 385 and Imidazole on Cell Viability in Triple Negative Breast Cancer Cell Lines

Özet

Amaç Meme kanseri türleri içerisinde triple negatif meme kanseri en agresif türlerdendir Günümüzde hala etkili bir sistemik tedavi seçeneği bulunmamaktadır Son yıllarda antifungal ajan olarak olarak kullanılan imidazol'ün kanser tedavisinde etkili olabileceği gösterilmiştir Ancak imidazol'ün antioksidan yolları baskılayan bir ajanla kombine edilmesinin triple negatif hücre dizilerindeki antikanser etkinliğini etkileyip etkilemediği bilinmemektedir Çalışmamızda, antioksidan savunmada rol alan kritik bir molekül olan Nrf 2 ’nin inhibitörü ML 385 ile imidazol kombinasyonunun triple negatif meme kanseri hücre dizilerindeki antikanser etkinliğini araştırmayı amaçladık Yöntem Çalışmamızda MDA MB 231 (ER --/PR --/HER 2 triple negatif meme kanseri hücre dizileri kullanıldı Kombinasyonel uygulama için ML 385 1 2 ve 4 µM, imidazol 1 5 10 ve 20 mM dozlarında hücrelere uygulandı İmidazol ve ML 385 ’in tek başına ve kombine bir şekilde uygulamasının hücre canlılığı üzerine etkisi 72 saatte MTT analizi ile belirlendi Kombinasyonel uygulamanın hücre morfolojisi üzerine etkileri ışık mikroskobu kullanılarak incelendi Bulgular MDA MB 231 hücre dizilerinde tek başına 5 mM ve üzerindeki dozlarda imidazol uygulaması 72 saatte istatistiksel olarak anlamlı bir şekilde hücre canlılığını azalttı(p< 0 05 Benzer bir şekilde ML 385 ’de 1 µM ve üzerindeki dozlarda doz bağımlı bir şekilde hücre canlılığını istatistiksel olarak azalttı ( 0 05 Tek başına ML 385 ve tek başına imidazol uygulanan gruplarla kıyaslandığında, 1 µM ML 385 ile 5 mM ve üzeri dozlarda imidazol kombinasyonların uygulandığı gruplarda hücre canlılığının daha fazla azaldığı görüldü ( 0 05 Benzer etki 2 µM ML 385 ile 5 mM ve üzeri dozlarda imidazol kombinasyonların uygulandığı gruplarda da görüldü ( 0 05 Tek başına uygulamalarda hücre morfolojisi 20 mM gibi yüksek dozlarda etkilenirken, kombinasyonel uygulamada hücre morfolojisinin 5 mM’lık dozdan itibaren değiştiği gözlendi Sonuç Bulgularımız ML 385 ’in imidazol ile kombinasyonunun, triple negatif meme kanseri hücre dizilerinde imidazol'ün antikanser etkisini güçlendirdiğini göstermektedir Anahtar Kelimeler İmidazol, ML 385 Nrf 2

Abstract

Aim Triple negative breast cancer is one of the most aggressive types of breast cancer and there is still no effective systemic treatment option Recently years it has been shown that imidazole which was initially developed as an antifungal antibiotic might be effective for cancer treatment However it is unknown whether the combination of imidazole with an agent which suppresses antioxidant pathways affects the anticancer activity in triple negative cell lines In this study we aimed to investigate of anticancer effect of combination of imidazole with ML 385 which an inhibitor of Nrf 2 that have critical role in antioxidant defence in triple negative breast cancer cell lines Methods: MDA-MB-231 (ER-/PR-/HER2-) triple negative breast cancer cell lines were used in our study. For combinational treatment, ML385 and imidazole were treated to cells at doses 1, 2, 4 μM and 1, 5, 10, 20 mM, respectively. Effect of imidazole alone or in combination with ML385 on cell viability was determined using MTT analysis at 72 hours. Effects of combinational treatment on cellular morphology were examined under bright field microscope. Results: Alone treatment of imidazole significantly decreased cell viability at 5 mM and above doses at 72 hours(p