Tavuk etinde antibiyotik kalıntılarının sıvı kromatografi sıralı kütle spektrometresi ile çoklu kalıntı tarama analizi için metot geliştirilmesi

Method development for the likid chromatography tandem mass spectrometry multi residue screening analysis of residue antibiotics in poultry meat

Güven ÖZDEMİR, Rıdvan UYSALER, Ramazan ULUDAĞ, Yasemin COŞKUN, Ahmet Turan ERDOĞDU

Özet

Bu çalışmada tavuk etlerinde 4 tetrasiklin, 4 makrolid, 8 sülfonamid, 1 diaminoprimidin, 9 kinolon, 10 beta laktam ve 3 amfenikol türevi toplam 39 bileşiğin sıvı kromatografi sıralı kütle spektrometresi (LC-MS/MS) ile belirlenmesi için yöntem geliştirilmesi ve Avrupa Birliğinin 2002/657 sayılı direktifine göre validasyonunun yapılması amaçlandı. Bileşiklerin belirlenmesi için iki özütleme işlemi ile hazırlanan özütler, LC-MS/MS sistemine iki enjeksiyon ile verildi. Birinci özütlemede tavuk etinden antibiyotiklerin özütlenmesi, Na2EDTA ve % 70 metanol ile gerçekleştirildi. Santrifüj ile kaba parçacıklar çöktürüldü, üst faz alınarak su ilave edildi ve filtreden geçirilerek LC-MS/MS sistemine birinci enjeksiyon yapıldı. Birinci özütleme birinci enjeksiyon ile sülfonamid, tetrasiklin, kinolon, beta laktam, makrolid ve diaminoprimidin türevi 36 bileşik 0.7 26.4 μg/kg aralığında tespit edildi. İkinci özütleme, su ve etil asetat ile gerçekleştirildi. Santrifüj ile kaba parçacıklar çöktürüldü ve üst faz alınarak kuruyana kadar buharlaştırıldı. Kurumuş olan özüt, su ve n-hekzan ile çözüldü, santrifüj edildi ve alt faz, filtreden geçirilerek LC-MS/MS sistemine ikinci enjeksiyon yapıldı. İkinci özütleme ikinci enjeksiyon ile amfenikol türevi 3 bileşik 0.03 1.4 μg/kg aralığında tespit edildi.

Abstract

In this study, it is aimed to develop a method of multi residue screening analysis for detecting total 39 compounds (4 tetracycline, 4 macrolide, 8 sulfonamide, 1 diaminopyrimidine, 9 quinolones, 10 betalactams and 3 amphenicol derivatives) in poultry meat by likid chromatography tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) system and to validate that method according to European Union Directive no 2002/657/EC. In order to detect the compounds, the extractions prepared by two extract process are given into LC-MS/MS system. In the first extraction, extracting the antibiotics from poultry meat was performed by Na2EDTA and 70 % methanol. Coarse particles were settled down by centrifugation, water was added while taking the upper phase, first injection was made into LC-MS/MS system after filtering. At the first extraction and first injection, 36 compounds of sulfonamide, tetracycline, quinolone, betalactam, macrolide and diaminopyrimidine derivatives were detected in the interval of 0.7 26.4 μg/kg. The second extraction was performed by water and ethyl acetate. Coarse particles were precipitated by centrifugation and evaporated until being dry while taking supernatant. The dried extraction was dissolved by water and n-hexan, centrifuged and second injection was made into LC-MS/MS system while filtering through lower phase. Three amphenicol derivative compounds were detected at the second extraction and second injection in the interval of 0.03 1.4 μg/kg.