MicroRNA-200c Mediates the Mechanism of MAPK8 Gene Regulating Follicular Development in Sheep

MicroRNA-200c Koyunda MAPK8 Gen Düzenleyici Foliküler Gelişim Mekanizmasına Aracılık Eder

Özet

Most sheep breeds are seasonal estrus and single birth animals. In order to improve pastoral area economy and lambing rate, In order toimprove pastoral area economy and lambing rate, and It is very important to study the key genes aff ecting sheep reproductive traits atthe molecular level. On the basis of early verification of the relationship between miR-200c and MAPK8 gene target. In this experiment,after over-expression of miR-200c in ovarian granulosa cells, the expression of mitogen-activated protein kinase 8 (MAPK8), frizzledclass receptor 3 (FZD3), G protein subunit alphaq (GNAQ), jun proto-oncogene (JUN), protein kinase C beta (PRKCB) in estrus-relatedpathway genes was detected by qRT-PCR, and the expression of estradio (E2) and progesterone (P4) in reproductive stimulation wasdetected by ELISA. The relationship between MAPK8 gene and follicular ovulation was analyzed. The results showed that up-regulatedcorpus follicular mRNA expressions of FZD3, GNAQ (P<0.01), and down-regulated mRNA expressions of MAPK8, PRKCB (P<0.05) andJUN (P<0.01). The secretion of E2 first increased and then decreased with the passage of time, while the secretion of P4 first increasedand then returned to the normal level with the passage of time, which was consistent with the development of follicles in mammalianestrus. In summary, miR-200c-mediated MAPK8 gene has a strong promoting eff ect on E2 secretion and a certain regulating eff ect on P4,suggesting that miR-200c-mediated target gene MAPK8 plays a regulating role in follicular development.

Abstract

Koyun ırklarının çoğu mevsimsel östrus gösteren ve tek doğum yapan hayvanlardır. Kırsal alan ekonomisini iyileştirmek ve kuzulama oranını artırmak için, miR-200c ve MAPK8 gen hedefl eri arasındaki ilişkinin erken doğrulanması temelinde koyun üreme özelliklerini etkileyen önemli genleri moleküler düzeyde incelemek oldukça önemlidir. Bu çalışmada, yumurtalık granüloza hücrelerinde miR200c’nin aşırı ekspresyondan sonra, östrusla ilişkili yolak genlerinden Mitojen Aktiveli Protein Kinaz 8 (MAPK8), Frizzled sınıf reseptör 3 (FZD3), G Protein Altünite Alfa Q (GNAQ), Jun Protoonkogen (JUN), Protein Kinaz C Beta (PRKCB) ekspresyonu QT-PCR ile ve üreme stimülasyonunda östradiol (E2) ve progesteron (P4) ekspresyasyonu ELISA ile saptandı. MAPK8 geni ile foliküler ovulasyon arasındaki ilişki incelendi. Sonuçlar, FZD3, GNAQ’nın korpus foliküler mRNA ekspresyonlarının arttığını (P<0.01) ve MAPK8, PRKCB (P<0.05) ve JUN (P<0.01)’un mRNA ekspresyonlarının ise azaldığını gösterdi. Memeli östrusundaki folikül gelişim ile uyumlu olarak E2 salgısı başlangıçta arttı sonra zamanla azalırken, P4 salgısı başlangıçta arttı ve daha sonra zamanla normal seviyeye döndü. Özetle, miR-200c aracılı MAPK8 geninin E2 salgılanması üzerinde güçlü bir teşvik edici etkisi ve P4 üzerinde belirli bir düzenleyici etkisi vardır, bu da miR-200c aracılı hedef gen MAPK8’in foliküler gelişimde düzenleyici bir rol oynadığını düşündürmektedir.