Investigation of the Effect of Hyperforin and Hypericin on Inflammatory Response in RAW 264.7 Macrophages

Hiperforin ve Hiperisinin RAW 264.7 Makrofajında İnflamatuar Yanıt Üzerine Etkisinin İncelenmesi

Özet

Objective: This study aims to determine the antiinflammatory property of hypericin and hyperforin using in vitro model. Materials and Methods: In this study, 0, 25, 50, 75 and 100 nM hyperforin and 0, 2.5, 5, 7.5 and 10 μM hypericin were treated to lipopolysaccharide (LPS) stimulated RAW 264.7 macrophages. We aimed to display the antiinflammatory effects of hypericin and hyperforin via measuring prostaglandin E2 (PGE2) and nitric oxide (NO) production and cyclooxygenase-2 (COX-2) and inducible nitric oxide synthase (iNOS) gene expression in LPS induced RAW 264.7 macrophages. Results: Our study has shown that all applied concentration of hyperforin and hypericin decreased nitric oxide (NO) production and inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) gene expression in RAW 264.7 macrophages, significantly. Similarly, all applied concentration of hyperforin and hypericin decreased prostaglandin E2 (PGE2) production but this decrease was statistically significant only in groups treated with 75 and 100 nM hyperforin and 7.5 and 10 μM hypericin. Conclusion: This indicates that hyperforin and hypericin inhibited NO and PGE2 production and iNOS and COX- 2 gene expression in RAW 264.7 macrophages in a dosedependent manner. Inhibition of NO and PGE2 production by hyperforin and hypericin is a result of the inhibition of iNOS and COX-2 gene expression. For this reason, it is possible to say that hypericin and hyperforin can be used to reduce the inflammatory response.

Abstract

Amaç: Bu çalışma in vitro model kullanarak hiperisin ve hiperforinin anti-inflamatuvar özelliğini belirlemeyi amaçlamaktadır. Gereç ve Yöntem: Bu çalışmada, lipopolisakkarit (LPS) ile uyarılmış RAW 264.7 makrofajları, 0, 25, 50, 75 ve 100 nM hiperforin ve 0, 2,5, 5, 7,5 ve 10 μM hiperisin ile muamele edilmiştir. LPS ile indüklenmiş RAW 264.7 makrofajlarında, prostaglandin E2 (PGE2) ve nitrik oksit (NO) üretimi ile siklooksijenaz-2 (COX-2) ve indüklenebilir nitrik oksit sentaz ( iNOS) gen ekspresyonunu ölçerek hiperisin ve hiperforinin antienflamatuar etkilerini göstermeyi amaçladık. Bulgular: Yaptığımız çalışma, uygulanan tüm hiperforin ve hiperisin konsantrasyonlarının, RAW 264.7 makrofajlarında nitrik oksit (NO) üretimini ve indüklenebilir nitrik oksit sentaz ( iNOS) ve siklooksijenaz 2 (COX-2) gen ekspresyonlarını önemli ölçüde azalttığını göstermektedir. Benzer bir şekilde, uygulanan tüm hiperforin ve hiperisin konsantrasyonlarının prostaglandin E2 (PGE2) üretimini azalttığı ancak bu düşüşün sadece 75 ve 100 nm hiperforin ile 7,5 ve 10 μM hiperisin uygulanan gruplarda istatistiksel olarak anlamlı olduğu görülmüştür. Sonuç: Bu durum, hiperforin ve hiperisinin doza bağımlı bir şekilde RAW 264.7 makrofajlarındaki NO ve PGE 2 üretimini ve iNOS ve COX-2 gen ekspresyonunu inhibe ettiğini göstermektedir. Bu nedenle, hiperisin ve hiperforinin inflamatuar yanıtı azaltmak için kullanılabileceğini söylemek mümkündür.