Dergiler / Veterinarium / 2000 / Cilt: 11 - Sayı: 1
Genetic and molecular analysis of the flanking deletions around the P(GAL4)c682 insert
- Dergi
- Veterinarium
- Sayfa
- 32–39
- DOI
- —
Özet
Hareketli DNA elementlerinden olan P-elementi gelişim evrelerini ileri genetik analiz yöntemi ile açıklamada yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu çalışmada homozigot siteril olan P[GAL4]c682'nin genetik analizi amaçlanmaktadır.P[GAL4]c682 etrafında oluşturulan 112 adet genetik kayıplı rekombinant kromozomal markerlar yardımı ile incelendi. Bunların 80adetinin P[GAL4]c682'nin sol tarafına, 32 tanesininde sağ tarafına lokalize olan rekombinantlar olduğu belirlendi, incelenen rekombinantlar rekombinantlarm 95 adeti non-letal, 17 tanese ise homozigot letal olarak tespit edildi. Non-letal rekombinantlardan 26 adeti stérilité testi ile P[GAL4]c682 ile allelik bulundu. Ayrıca letal rekombinantlarm 11 tanesinin allelizm testlerinde P[GAL4]c682 ile allelik olduğu belirlendi.Siteril rekombinantlar moleküier olarak PCR ile analiz edildi ve sterilitenin nedenini işaret eden açık bir bulguya rastlanamadı. Tek bir komplimentasyon grubu oluşturan rekombinant letalleri, P[GAL4]c682 ile aynı kromozomal bölgeye lokalize olan kromozomal aberrasyonlar ile allelik bulundu. İleri dönem embryonik-birincil larval yaşam evresi letalitenin gerçekleştiği zaman olarak tespit edildi. Kütikıl preparasyonları ve antikor işaretlemesi ile bu letallerde gözle görülebilir herhangi bir morfolojik bozukluk gözlenmedi. Yapılan moleküler analiz çalışmaları bir miktar DNA fragmentinin kaybolduğu ve böylelikle letallerin P[GAL4]c682'nin sol tarafına lokalize olduğuna doğruladı
Abstract
A family of transposable elements, P-elements, have been used extensively to reveal developmental processes by forward genetics. This article examines a homozygous male sterile P[GAL4]c682 at the genetic level.One hundred and twelve flanking deletions were examined using chromosomal markers at either side of the insert. The majority of the recombinants (80) were generated on the left hand-side and the rest was right hand-side recombinant (32). Of the 112 recombinants, 95 were straight recombinants (non-lethal), 17 were found to be homozygous lethal. The non-lethal recombinants were crossed to the original insert P[GAL4]c682 for allelism tests and tested for sterility via dissection. Only 26 of them were found to be sterile and allelic to P[GAL4]c682. In addition, eleven lethal rekombinant out of 17 were found to be allelic to P[GAL4]c682.Sterile recombinants were molecularly analysed by PCR and no obvious molecular data was fourid to explain the sterility phenotype. The lethal recombinants formed a single comp-lementation group were found to be allelic to deficiency chromosomes from the P[GAL4]c682 genomic region. The lethality for the lethals was determined to be late embryo-first instar border and found no visible defect in cuticle preparations and antibody labelling. Molecularly, PCR analysis showed that they mapped to the left of the P-insert and lose some genomic fragment.