Dergiler / Veterinarium / 2006 / Cilt: 17 - Sayı: 1
Application of the MTT assay for titration of cytopathic bovine viruses
- Dergi
- Veterinarium
- Sayfa
- 26–29
- DOI
- —
Özet
Araştırmada, sığırların sitopatojen viruslarının titrasyonunu gerçekleştirmek amacıyla kolorimetrik bir metot geliştirildi. Kolorimetrik MTT metodu, hücre kültürlerinde sadece canlılık aktivitesini devam ettiren hücrelerde bulunan mitokondrial dehidrogenaz enzimi tarafından, sarı renkli MTT maddesinin tetrazolium tuzlarına indirgenerek mavi formazan kristallerine dönüştürülmesi ilkesine dayanmaktadır. Bovine herpesvims type 1 (BHV-1), parainfluenza 3 (PI-3), bovine rota virus (BRV) and bovine adenovirus type 1 (BAV-1) viruslarının titrasyonu, MTT ve DKID50 yöntemleri ile MDBK devamlı hücre kültürleri kullanılarak mikropleytlerde gerçekleştirildi. Virusların titrelerinin saptanması amacıyla kullanılan standart DKID50 ve MTT yöntemleri ile elde edilen sonuçların, birbirleriyle iyi bir korelasyon gösterdiği belirlendi.
Abstract
In the current study, a colorimetric method for titration of cytopathic bovine viruses was developed. MTT colorimetric assay is based on the ability of a mitochondrial dehydrogenase enzyme from viable cells in culture to reduce the tetrazolium salts of the yellow MTT and form a blue formazan crystal. Bovine herpesvims type 1 (BHV-1), parainfluenza 3 (PI-3), bovine rota virus (BRV) and bovine adenoviras type 1 (BAV-1) were titrated using the MTT and TCID50 assays into MDBK continuous cell lines in multi-well microplate. A good correlation was found between the results obtained using the standard TCID50 assay and the MTT assay methods for determining the viral titration endpoint.