Dergiler / Niğde Ömer Halisdemir Üniversitesi Mühendislik Bilimleri Dergisi / 2017 / Cilt: 6 - Sayı: 2
DENEYSEL TASARIM METODU KULLANILARAK YÜKSEK PERFORMANSLI SIVI KROMATOGRAFİSİ İLE AMOKSİSİLİN TAYİNİ
- Sayfa
- 394–405
- DOI
- —
Özet
Yaygın bir antibiyotik olan amoksisilinin analizinde yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC) kullanılmaktadır. İlaç endüstrisinde gerçekleştirilen analizlerde zaman ve maliyet önemlidir. Bu nedenle bu çalışmada HPLC ile amoksisilin analizinde optimizasyon için kemometrik yöntemler kullanılmıştır. Mobil fazın metanol oranı, pH’sı ve akış hızı faktör olarak, alıkonma zamanı, pik alanı ve pik yüksekliği cevap yüzeyi olarak belirlenmiştir. Faktörler ve cevap yüzeyleri arasındaki bağıntı Design Expert 7.0.0. programı kullanılarak elde edilmiştir. Optimizasyon, alıkonma zamanı 5-6 dakika tutularak gerçekleştirilmiştir. Deneysel optimizasyon değerleri Merkezi Bileşik Tasarım Yöntemiyle hesaplanan değerlerle karşılaştırıldığında, pH için %99,6, akış hızı için %95, metanol yüzdesi için %98 doğruluk tespit edilmiştir. Phenomenex C18 100A (250×4,00 mm, 5 µm) kolonunun kullanıldığı yöntemde optimum koşullar %15 metanol, pH 8,5 ve akış hızı 0,8 mL/dk şeklinde belirlenmiş, yöntemin belirleme sınırı (LOD, alan için) 0,0134 mg/L ve tayin sınırı (LOQ, alan için) 0,0452 mg/L olarak saptanmıştır.
Abstract
High performance liquid chromatography (HPLC) is used for analysis of amoxicillin which is an antibiotic widely used. Time and cost of analysis performed in the pharmaceutical industry are important. Therefore, in this study, chemometric methods were used to optimize amoxysiline analysis by HPLC. The percentage of methanol in the mobile phase, pH and flow rate were used as a factor, the retention time, peak area and peak height were defined as the response surface. Correlation between these factors and the response surface was obtained using Design Expert 7.0.0. program. Optimization was performed by keeping retention time around 5-6 min. The experimental optimization variables values and calculated optimization variables values by using Central Composite Design Method were compared, and the accuracy of 99.6% for pH, 95% for flow rate and 98% for methanol percentage was determined. Optimum conditions for HPLC method with Phenomenex C18 100A (250 x 4.00 mm, 5 μm) column were 15% methanol, 8.5 pH and 0.8 mL/min flow rate, and the analytical performance of the method was as follows: limit of detection (LOD, for area) 0.0134 mg/L and limit of quantification (LOQ, for area) 0.0452 mg/L.