Dergiler / Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi / 2016 / Cilt: 22 - Sayı: 1
Determination of Ochratoxin-A in Cattle Liver By HPLC-FD Method
- Sayfa
- 1–5
- DOI
- —
Özet
Okratoksin- (OTA), Penicillium ve Aspergillus spp. tarafından üretilen bir mikotoksindir. OTA insanlar üzerinde karsinojenik, nefrotoksin ve immunosupresif etkilere sebep olmaktadır. Ayrıca toksin hayvan dokularında (böbrek, karaciğer, kas) birikerek, insan sağlığı için potansiyel tehlike kaynağı oluşturmaktadır. Bu çalışmadaki amaç, sığır karaciğerinde OTA varlığının HPLC-FD metodu ile araştırıldığı diğer çalışmaların sonuçlarını takiben, 2002/657/EC sayılı komisyon kararına uygun bir HPLC-FD metodu geliştirmektir. Bu amaç doğrultusunda; spesifite, doğrusallık, tespit limiti (LOD), tayin limiti, (LOQ), doğruluk ve kesinlik gibi parametreler değerlendirilmiştir. Doğrusallık; sekiz adet standart solüsyonun analizi ile belirlenmiştir. Korelasyon katsayısı (r2)>0.9999, tespit limiti 0.088 ng/ml ve tayin limiti 0.268ng/ml değerinde bulunmuştur. Doğruluk ve kesinlik analizleri üç farklı konsantrasyon seviyesi (1.0, 5.0 and 10.0 mg/kg) denk alınarak uygulanmıştır. Geri kazanım, %76.1-102.5 arasında bulunmuştur. Tekrarlanabilirlik relatif standart sapma (RSDr %) göre ifade edilerek; %3.7-14.28 arasında hesaplanmıştır. Tekrar üretilebilirlik sonuçları (RSDR%); birinci gün %0.16- 11.8, ikinci gün %2.15-17.88 arasında bulunmuştur. Metot oluşturulduktan sonra, OTA varlığı 15 adet doku örneğinde araştırılmıştır. Sadece 1 örnekte tayin limitine yakın oranda (0.2 mg/kg) OTA tespit edilmiştir. Sonuç olarak, üzerinde çalıştığımız bu HPLC-FD metodunun sığır karaciğerinde maksimum kalıntı limitleri altındabulunan OTA miktarlarının belirlemesinde kullanılmasını önermekteyiz.
Abstract
Ochratoxin-A (OTA) is a mycotoxin which is produced by several Penicillium and Aspergillus spp. OTA has carcinogenic, hepatogenic, nephrotoxic and immunosuppressive effects in human. The toxin accumulates in the animal tissues (kidney, liver and muscle) which could be potential harmful source for human health. Following results of previous investigations our aim was to validate HPLC-FD method for OTA determination in cattle liver which could be implemented in laboratory practise, complying with the European Union Commission Decision (2002/657/EC). Specificity, linearity of method, limit of detection (LOD), limit of quantification (LOQ), accuracy and precision were evaluated. The linearity of the method was determined by preparation of eight standard solutions. The standard curve showed high correlation coefficient (r2>0.9999). LOD and LOQ were determined as 0.088 ng/ml and 0.268 ng/ml, respectively. Accuracy and precision were established in three concentration levels: 1.0, 5.0 and 10.0 mg/kg. Recovery was in the range of 76.1 to 102.5% and repeatability (RSDr%) was expressed through relative standard deviation which resulted in the range of 3.7 to 14.28%. Reproducibility results (RSDR%) were found in the range of 0.16-11.8% for the first day and for the second day in the range of 2.15-17.88%. (Post-hock analysis of samples (n=15), only in one sample OTA was detected (0.2 mg/kg) as close to the LOQ value. As a result, we recommend this method for OTA detection and quantification in cattle liver, for concentrations which are lower than the maximum residue limits (MRL).