Dergiler / Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi / 2019 / Cilt: 25 - Sayı: 6
Effect of Culture Medium Treated with Non-thermal Plasma Energy on the Growth and Viability In-vitro of Fibroblast Cells from Asian Elephants (Elephas maximus)
- Sayfa
- 815–823
- DOI
- —
Özet
Non-thermal plasma (NTP) is being developed for a wide-range of medical applications such as improvement of wound healing, elimination of infective microorganisms, and treatment of cancer. This study investigated the effct of culture medium exposed to NTP on the proliferation in-vitro of skin fibroblasts from Asian elephants. Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM) was used as culture medium and was exposed to NTP with three diffrent intensities. The NTP reactive species Nitrite (NO2-) was measured in the treated medium before addition to cells. Fibroblasts were incubated for 24 h with NTP-treated complete medium supplemented with 10% Fetal Bovine Serum (FBS) and 1% antibiotic/antimycotic. Cell proliferation, the number of cells and viability rate were analysed using flw cytometry 24, 48 and 72 h after the start of the incubation. The proliferation rate of fibroblasts incubated with NTP treated medium was significantly higher (P<0.05) than controls and increased in a dose-dependent manner with increasing amount of NTP. Incubation of fibroblasts with NTP did not reduce their viability even at the highest dose of NTP. Culture medium treated with NTP energy may be used to improve healing of skin wounds in elephants. This study successfully shows that the medium treated with NTP was able to stimulate elephant skin fibroblasts proliferation and increase the total cell count but did not reduce cell viability in vitro. Containing buffring agent in culture media might reduce the effct of ROS generated by NTP. This might prevent using high dose of NTP to cause cell apoptosis and induce cell necrosis in this study. Future studies on the skin of living elephant are encouraged to develop more effctive and optimum treatment conditions.
Abstract
Termal olmayan plazma (NTP), yara iyileşmesinin hızlandırılması, enfektif mikroorganizmaların eliminasyonu ve kanser tedavisi gibi çeşitli tıbbi uygulamalar için geliştirilmektedir. Bu çalışmada NTP’ye maruz burakılan besiyeri ortamının Asya fillerinden elde edilen deri fibroblastlarının in vitro proliferasyonu üzerindeki etkisi araştırıldı. Bu amaçla Dulbecco’nun Modifiye Eagle’s Medium’u (DMEM) besiyeri olarak kullanıldı ve üç farklı yoğunlukta NTP’ye maruz bırakıldı. NTP reaktif türleri Nitrit (NO2-) hücrelere eklenmeden önce uygulandığı besiyerinde ölçüldü. Fibroblastlar, 24 saat boyunca, %10 Fetal Sığır Serumu (FBS) ve %1 antibiyotik/antimikotik içeren NTP ile muamele edilmiş besiyerinde inkübe edildi. İnkübasyonun başlamasından 24, 48 ve 72 saat sonra hücre proliferasyonu, hücre sayısı ve canlılık oranı akış sitometrisi kullanılarak analiz edildi. NTP ile muamele edilmiş besiyerinde inkübe edilen fibroblastların proliferasyon hızı, kontrol grubundan anlamlı olarak daha yüksek bulundu (P<0.05) ve artan NTP uygulaması ile birlikte doz bağımlı olarak arttığı belirlendi. Fibroblastların NTP ile inkübasyonu, en yüksek NTP dozunda bile canlılık oranını azaltmadı. Fillerde cilt yaralarının iyileşmesini hızlandırmak için NTP enerjisi uygulanan besiyeri kullanılabilir. Bu çalışma, NTP uygulanan besiyerinin fil derisi fibroblastlarının proliferasyonunu uyarabildiğini ve toplam hücre sayısını arttırdığını, bununla birlikte in-vitro olarak hücre canlılığını azaltmadığını göstermiştir. Besiyerinin tampon madde içermesi, NTP tarafından üretilen Reaktif Oksijen Türlerinin etkisini azaltabilir. Mevcut çalışmada bu durum hücre apoptozisine neden olmak ve hücre nekrozunu indüklemek için yüksek NTP dozlarının kullanılmasını engelleyebilir. Daha etkili ve optimum tedavi koşullarının geliştirilmesi için canlı fillerin derisinde yapılacak çalışmalar teşvik edilmelidir.