Çocuklarda Sevofluran ve Desfluran'ın Periferik Lenfositler Üzerine Genotoksik Etkilerinin Comet Assay Yöntemiyle Araştırılması

Investigation of Genotoxic Effect of Desflurane and Sevoflurane on Periferic Lymphocyte with Comet Assay Method

Yeşim IŞIKÇI,Ayşe Çiğdem TÜTÜNCÜ,Pınar KENDİGELEN,Serpil ÇAKMAKKAYA,Fatiş ALTINDAŞ,Güner KAYA

Özet

Amaç: Anesteziklerin kromozomal değişikliklere neden olduğunu gösteren klinik, sitogenetik çalışmalar mevcuttur. Biz çalışmamızda, sevofluran ve desfluranın çocuklarda olası genotoksik etkilerini araştırmayı hedefledik.Yöntemler: Araştırmada lenfositler, DNA tek, çift sarmalındaki kırıkların tespitinde kullanılan Commet Assay yöntemi kullanarak incelendi. Çalışmada anestezi süresi en az 120 dk olan 1-10 yaş arası 26 çocuk alındı. Anestezi öncesi alınan 3 mL venöz kan kontrol olarak kabul edildi, indüksiyon sonrası olgular rastgele iki gruba ayrılarak oksijen/hava ile desfluran (grup D) ve sevofluran (grup S) uygulanan grup olarak incelendi. Anestezi başlangıcından 60 dakika, 120 dakika, 1 gün ve 5 gün sonra alınan kan örneklerinden periferik lenfositler izole edilerek Comet Assay yöntemiyle incelendi. Lenfositler fluoresan mikroskopta değerlendirildi, görsel sınıflandırma yapılarak, % kuyruk faktörleri hesaplandı.Bulgular: Anestezi öncesi Comet cevapları açısından Sevofluran ve desfluran grupları arasında fark bulunmadı. Grup D ve grup S'de anestezi başlangıcından sonraki 60. dakika, 120. dakika, 24. saat, beşinci gün alınan kan örneklerinden bazal değerlere yakın veya aynı sonuçlar elde edildi. Desfluran ile sevofluran arasında tüm zamanlar kan örneklerinde istatistiksel olarak anlamlı fark bulunmadığı görüldü. Sonuç: Sevofluran, desfluran anestezisi sonrasında çocuk hastaların lenfositlerinde çekirdek yapının etkilenmeyerek hasarlanmadığı ve DNA hasarı oluşmadığı gösterildi.

Abstract

Aim:There are several clinical and cytogenetic studies that anesthetics cause choromosomal changes. We report data on the possible genotoxic properties of two inhalational anaesthetics, sevoflurane and desflurane in lymphocytes of children evaluated for genotoxic activity with comet assay.Methods: In this study lymphocytes were investigated with Comet Assay which establishes single, double DNA strand breaks. Twent six children aged 1-10 years, who were anaesthetized for at least 120 minutes, were included in the study. After standard induction, anaesthesia was maintained with inhalation of sevoflurane or desflurane in oxygen-air mixture. Three mililitres venous blood samples were obtained before the induction of anaesthesia (control), at 60. and 120. minutes of anaesthesia and on the first and fiveth days. Blood samples were evaluated by comet assay. Peripheral lymphocytes were isolated with blood samples and examined by Comet Assay method. Lymphocytes were evaluated with fluorescence microscopy, visual classification was performed and % tail factors were calculated.Results: There was no difference in the mean comet response before anaesthesia between the two groups. However, there was no significant difference in the mean comet response at 60 and 120 minutes of anaesthesia and 1 and 5 days after surgery between patients who received sevoflurane and desflurane.Conclusion: It was demonstrated that structure of lymphocytes nucleus did not causedamage and DNA injury after the sevoflurane and desflurane anesthesia in pediatric patients