EFFECT OF NICOTINE ON PERIODONTAL LIGAMENT DERIVED CELLS CULTURED UNDER MECHANICAL STRESS

MEKANİK STRESS ALTINDA KÜLTÜRE EDİLEN PERİODONTAL LİGAMENT KAYNAKLI HÜCRELERDE NİKOTİNİN ETKİLERİ

Özet

Background and Aim: The purpose of this study was to investigate the effects of nicotine on periodontal ligament (PDL) cells cultured under mechanical stress. Materials And Methods: Periodontal ligament-derived cells obtained from rat incisors were cultured with nicotine (20 ng/ml, NI), under centrifugal force (2000 rpm/20 min, MS) as experimental group (NI+MS). The control groups were treated with NI alone (NI), under MS without NI (MS), and without any treatment (CONT). An immunofluorescence study using an anti-receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand (RANKL) primary antibody was also performed. The mRNA levels of RANKL, osteoprotegerin (OPG), interleukin-6 (IL-6), and vascular endothelial growth factor (VEGF) were analyzed using quantitative real-time polymerase chain reaction at day 1 of culture. Results: RANKL positive cells and RANKL mRNA expression in the NI+MS group, NI group, and MS group were significantly higher than that of the CONT group. Expression of RANKL mRNA of the NI+MS group was higher than that of the CONT group and NI group. Expression of OPG mRNA in the MS group was significantly higher than that of other 3 groups. Expression of IL-6 and VEGF mRNA in the NI+MS group, NI group and MS group were significantly higher than that of the CONT group. Conclusion: Nicotine suppressed expression of OPG and accelerated osteoclastogenesis in PDL-derived cells under centrifugal force.

Abstract

Amaç: Bu çalışmanın amacı mekanik stress altında kültüre edilen periodontal ligament hücrelerinde (PDL) nikotinin etkilerini araştırmaktır. Gereç ve yöntemler: Fare kesici dişlerinden elde edilen periodontal kaynaklı hücreler, deney grubu olarak (NI+MS) nikotin ile (20 ng/ml, NI) santrifüjel kuvvet altında (2000 rpm/20 dk, MS) kültüre edilmişlerdir. Kontrol grupları, sadece NI (NI), MS altında NI içermeyen (MS), ve herhangi bir işlem uygulanmamış (CONT) olarak ayrılmıştır. Nüklear factor-kappa B ligand (RANKL) primer antikorunun antireseptör aktivatörü kullanılarak immünoflorasan bir çalışma yapılmıştır. RANKL, osteoprotegerin (OPG), interlökin-6 (IL-6), ve vasküler endotelyal büyüme faktörü (VEGF) mRNA seviyeleri kuantitatif real-time polimeraz zincir reaksiyonu kullanilarak 1 günlük kültürde analiz edilmiştir. Bulgular: RANKL pozitif hücreler ve NI+MS, NI ve MS gruplarındaki mRNA salınımı kontrol grubundan belirgin bir şekilde daha yüksek bulunmuştur. NI+MS grubundaki RANKL mRNA salınımı CONT ve NI gruplarından daha yüksek bulunmuştur. MS grubundaki OPG mRNA salınımı diğer üç gruptan belirgin bir şekilde yüksektir. NI+MS, NI ve MS gruplarındaki VEGF ve IL-6 mRNA salınımı CONT grubundan belirgin bir şekilde yüksektir. Sonuçlar: Nikotin, santrifüjel kuvvet altındaki PDL-kaynaklı hücrelerdeki OPG salınımını baskılamış ve osteoklastogenezisi hızlandırmıştır